研究目的:RRS1(核糖體合成調(diào)節(jié)蛋白1)是島津于1999年在酵母中發(fā)現(xiàn)的一種新型核糖體合成調(diào)節(jié)蛋白,它在核糖體生物合成中參與25s rRNA的成熟和60s核糖體大亞基的組裝。近幾年研究發(fā)現(xiàn)RRS1在人類某些腫瘤中過表達,與結(jié)直腸癌,肝癌和乳腺癌的增殖有關(guān),但其在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用仍不清楚。本研究通過體外乳腺癌細胞功能實驗和體內(nèi)小鼠乳腺癌模型探討人源RRS1/小鼠源Rrs1對乳腺癌轉(zhuǎn)移的影響。研究方法:(1)蛋白免疫印跡法(WB)和實時熒光定量PCR(qPCR)檢測RRS1在人乳腺癌MDA-MB-231細胞、小鼠乳腺癌4T1細胞及正常乳腺上皮細胞HMEC中蛋白及mRNA水平的表達量。(2)MDA-MB-231細胞采用慢病毒ShRNA-RRS1轉(zhuǎn)染的方式,敲降RRS1基因的表達量,4T1細胞采用小干擾siRNA-Rrs1轉(zhuǎn)染的方式,敲降Rrs1基因的表達量,并用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方式過表達Rrs1。轉(zhuǎn)染結(jié)束,使用熒光顯微鏡觀察細胞轉(zhuǎn)染效率,并用qPCR和Western Blotting進一步檢測RRS1敲降效率、Rrs1敲降及過表達效率。(3)采用CCK8實驗檢測MDA-MB-231細胞RRS1...

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【學(xué)位級別】：碩士

圖1（A、B）WB檢測RRS1基因在乳腺癌細胞MCF7，BT549，MDA-MB-231，4T1和正常乳腺細胞HMEC中的表達量

圖3（A）CCK8實驗檢測Rrs1基因敲降后，對4T1細胞增殖的抑制作用，Rrs1過表達后，對4T1細胞增殖的促進作用

圖4(A)劃痕實驗檢測小鼠乳腺癌4T1細胞與人乳腺癌MDA-MB-231細胞中RRS1/Rrs1基因?qū)毎w移的影響,每組n=4，Bar=200μm,**P<0.01

圖5（A）全功能微孔板檢測儀檢測，LUC-4T1細胞化學(xué)發(fā)光強度是4T1細胞的5倍

本文編號：3884086