目的:探討黃芪甲苷對腎癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其作用機(jī)制。方法:用終濃度為20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的黃芪甲苷處理腎癌細(xì)胞A498作為不同濃度黃芪甲苷處理組,正常培養(yǎng)的細(xì)胞作為對照(NC)組;將anti-miR-con、anti-miR-21轉(zhuǎn)染至細(xì)胞A498中,記為anti-miR-con組、anti-miR-21組;將miR-con、miR-21轉(zhuǎn)染至細(xì)胞A498中再用80μmol/L黃芪甲苷處理作為HSJG+miR-con組、HSJG+miR-21組。四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測細(xì)胞存活率;蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)檢測裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、細(xì)胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡;實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測miR-21表達(dá)水平。結(jié)果:與對照組相比,不同濃度黃芪甲苷處理組腎癌細(xì)胞A498中細(xì)胞存活率顯著降低,Cyclin D1表達(dá)水平顯著降低,Cleaved-caspase-3表達(dá)水平顯著升高,細(xì)胞凋亡率顯著升高,小鼠腫塊...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞處理與分組
        1.2.3 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        1.2.4 Western Blot檢測Cleaved-caspase-3、Cyclin D1蛋白表達(dá)水平
        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.6 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測miR-21表達(dá)水平
        1.2.7 驗證黃芪甲苷和miR-21對小鼠腫瘤大小的影響
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度的黃芪甲苷對腎癌A498細(xì)胞活力的影響
    2.2 不同濃度的黃芪甲苷對腎癌細(xì)胞A498凋亡的影響
    2.3 不同濃度的黃芪甲苷對miR-21表達(dá)水平的影響
    2.4 miR-21低表達(dá)對腎癌細(xì)胞A498增殖和凋亡的影響
    2.5 miR-21高表達(dá)對黃芪甲苷抑制腎癌細(xì)胞A498增殖和促進(jìn)凋亡的影響
    2.6 小鼠體內(nèi)實驗驗證
3 討論



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