蜱是一種吸血的體外寄生蟲,具有非常廣泛的宿主范圍。本研究中的麻點璃眼蜱(Hyalomma rufipes)為二宿主蜱,常見于荒漠和半荒漠地區(qū),一般分布在我國的內(nèi)蒙古、山西、寧夏、新疆等地。鈍刺血蜱(Haemaphysalis doenitzi)為三宿主蜱,常見于野地和叢林中,主要分布在我國海南、福建、臺灣、云南等地。蜱在吸血過程中能夠傳播多種病原體,對人類健康和畜牧業(yè)的發(fā)展產(chǎn)生極大威脅。目前蜱傳疾病的防治仍以化學(xué)防治為主,但是長期使用化學(xué)藥物會對環(huán)境造成污染,并且蜱長期適應(yīng)產(chǎn)生的耐藥性也是化學(xué)防治的短板,因此生物防治、免疫防治以及基因組學(xué)等逐漸成為蜱類防治的研究熱點。鐵蛋白(Ferritin)普遍存在于動物、植物和微生物中,是生物體維持鐵穩(wěn)態(tài)的重要蛋白,在解毒、抵抗氧化應(yīng)激、參與先天免疫應(yīng)答等方面發(fā)揮著不可或缺的作用。蜱吸血時要應(yīng)對宿主血液中的大量鐵和外源微生物,研究鐵蛋白在蜱血餐消化和免疫防御過程中的作用機制具有深遠(yuǎn)意義。本論文以麻點璃眼蜱和鈍刺血蜱為研究對象,利用基因克隆、原核表達、熒光定量PCR、RNAi等技術(shù),系統(tǒng)的研究了三種蜱類鐵蛋白。通過基因克隆,得到三條鐵蛋白基因,分別命...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 綜述
    1.1 蜱的概述
        1.1.1 蜱的介紹
        1.1.2 蜱的防治
    1.2 鐵蛋白的研究進展
        1.2.1 鐵蛋白的分類
        1.2.2 鐵蛋白的結(jié)構(gòu)
        1.2.3 鐵蛋白的功能
    1.3 研究目的和意義
2 麻點璃眼蜱和鈍刺血蜱鐵蛋白基因的克隆
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 HrFer1、HrFer2和HdFer基因的克隆
        2.2.2 HrFer1、HrFer2和HdFer的生物信息學(xué)分析
    2.3 討論
3 麻點璃眼蜱和鈍刺血蜱鐵蛋白基因的原核表達
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 創(chuàng)建表達載體
        3.2.2 初步誘導(dǎo)表達
        3.2.3 重組蛋白的質(zhì)譜鑒定
        3.2.4 表達條件的優(yōu)化
        3.2.5 rHrFer1、rHrFer2和rHdFer的純化
    3.3 討論
4 麻點璃眼蜱和鈍刺血蜱鐵蛋白基因的功能分析
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 鐵螯合活性分析
        4.2.2 抗氧化活性分析
        4.2.3 HrFer1、HrFer2和HdFer的表達量分析
        4.2.4 RNA干擾分析
        4.2.5 低溫脅迫對HrFer1和HrFer2 表達量的影響
    4.3 討論
5 小結(jié)
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果清單



本文編號：3805485