近年來(lái),結(jié)直腸腫瘤的高發(fā)病率和高死亡率使其成為當(dāng)今世界臨床腫瘤學(xué)上迄待解決的難題。腫瘤表觀遺傳學(xué)研究中,抑癌基因的缺失和失調(diào)普遍被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生和發(fā)展的重要機(jī)制。G蛋白受體信號(hào)通路作為腫瘤發(fā)病機(jī)制研究中的關(guān)鍵信號(hào)調(diào)節(jié)通路之一被廣泛關(guān)注,而G蛋白受體信號(hào)通路調(diào)節(jié)蛋白(RGS)蛋白在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的重要性也被逐漸認(rèn)識(shí)。目的:G蛋白受體信號(hào)通路調(diào)節(jié)蛋白R(shí)GS17,可通過(guò)激活Gα蛋白水解蛋白,終止G蛋白受體信號(hào)通路。已有研究證明,該基因與許多其他類(lèi)型腫瘤相關(guān),但其在結(jié)直腸腫瘤中的研究卻很少見(jiàn)到。本研究的目的就是探究RGS17在結(jié)直腸腫瘤中表達(dá)水平的變化,這種變化具體起到何種作用,對(duì)腫瘤的進(jìn)展有沒(méi)有影響及其具體機(jī)制。方法:利用RT-PCR和Western-blot研究RGS17的在結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平;運(yùn)用免疫組化實(shí)驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析評(píng)估RGS17在結(jié)直腸腫瘤組織中的表達(dá)水平及其與腫瘤臨床病理特征的關(guān)聯(lián)性;通過(guò)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染構(gòu)建RGS17穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株進(jìn)行增殖、遷移、鈣離子濃度檢測(cè)、凋亡實(shí)驗(yàn)評(píng)估RGS17對(duì)腫瘤細(xì)胞的生理性功能的調(diào)節(jié)能力,利用Western-blot摸索RGS17對(duì)細(xì)胞信號(hào)通路及相關(guān)蛋...

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略語(yǔ)及中英文對(duì)照
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
    2.2 人結(jié)直腸組織標(biāo)本
    2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.4 動(dòng)物飼養(yǎng)
    2.5 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染RGS17的大腸癌細(xì)胞株的構(gòu)建
    2.6 半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
    2.7 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞生存活力
    2.8 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)
    2.9 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
    2.10 TRANSWELL細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
    2.11 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    2.12 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期
    2.13 流式細(xì)胞儀檢測(cè)胞質(zhì)鈣離子濃度
    2.14 蛋白免疫印跡(WESTERN-BLOT)分析
    2.15 免疫組化及其分析方法
    2.16 人大腸癌裸鼠皮下種植瘤模型
    2.17 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 RGS17在結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞中低表達(dá)
    3.2 RGS17在結(jié)直腸腫瘤組織中低表達(dá)
    3.3 RGS17與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征及預(yù)后因素的相關(guān)性研究
    3.4 RGS17抑制結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞增殖和遷移能力
    3.5 RGS17轉(zhuǎn)染后對(duì)結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞凋亡能力的影響
    3.6 RGS17對(duì)CASR及胞質(zhì)鈣離子濃度的影響
    3.7 RGS17通過(guò)CASR調(diào)節(jié)WNT/B-CATENIN信號(hào)途徑及細(xì)胞凋亡
    3.8 RGS17對(duì)結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3796868