發(fā)布時(shí)間：2023-04-02 08:52

　　黃色條紋蛋白(Yellow stripe-like protein,YSL)功能重要且廣泛。紫花苜蓿YSL蛋白研究報(bào)道較少,作用機(jī)制尚不明確。紫花苜蓿再生體系的建立也不夠完善。本研究以轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草為材料,進(jìn)行后代篩選、亞顯微結(jié)構(gòu)觀察、光合參數(shù)測(cè)定實(shí)驗(yàn);分析了轉(zhuǎn)基因煙草對(duì)非生物脅迫,金屬脅迫的響應(yīng);研究了2,4-D與6-BA對(duì)肇東苜蓿愈傷組織形成的影響,主要研究結(jié)果如下:1.轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草后代篩選及性狀分析利用卡那培養(yǎng)基對(duì)轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草種子逐代篩選,得到了T2、T3代抗性苗;對(duì)抗性苗進(jìn)行PCR鑒定,獲到7個(gè)MsYSL6 T2株系和7個(gè)MsYSL7 T3株系。與WT相比,MsYSL6和MsYSL7基因的轉(zhuǎn)入導(dǎo)致煙草葉綠體中類囊體數(shù)目增多、淀粉粒增多;葉綠體含量增加;光合參數(shù)增加。MsYSL6和Ms YSL7基因?qū)胩岣吡宿D(zhuǎn)基因煙草的光合作用能力。2.轉(zhuǎn)MsYSL6煙草對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)鹽、堿脅迫下,轉(zhuǎn)MsYSL6煙草葉片黃化程度低于WT;干旱脅迫下,轉(zhuǎn)MsYSL6煙草的種子萌發(fā)率、幼苗根長(zhǎng)低于WT。MsYSL6基因?qū)胩岣吡藷煵輰?duì)鹽、...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 植物YSL基因家族
        1.1.1 YSL基因家族的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 YSL基因家族的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 YSL蛋白的功能
    1.2 紫花苜蓿
        1.2.1 紫花苜蓿的經(jīng)濟(jì)價(jià)值
        1.2.2 紫花苜蓿的轉(zhuǎn)基因技術(shù)
        1.2.3 紫花苜蓿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究進(jìn)展
        1.2.4 紫花苜蓿金屬營(yíng)養(yǎng)的研究進(jìn)展
    1.3 本課題的研究目的和意義
    1.4 技術(shù)路線
第2章 轉(zhuǎn)Ms YSL6、Ms YSL7 煙草后代篩選及分析
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
        2.2.3 主要試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 轉(zhuǎn)基因煙草種子篩選
        2.3.2 轉(zhuǎn)基因煙草植株P(guān)CR鑒定
        2.3.3 亞顯微結(jié)構(gòu)觀察
        2.3.4 葉綠素含量測(cè)定
        2.3.5 光合參數(shù)測(cè)定
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 篩選獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株
        2.4.2 PCR檢測(cè)結(jié)果
        2.4.3 轉(zhuǎn)基因煙草的亞顯微結(jié)構(gòu)
        2.4.4 轉(zhuǎn)基因煙草葉綠素含量及光合參數(shù)分析
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第3章 轉(zhuǎn)MsYSL6煙草對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 植物材料
        3.2.2 主要儀器設(shè)備
        3.2.3 主要試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 鹽堿脅迫處理煙草葉片
        3.3.2 干旱脅迫煙草種子
        3.3.3 煙草植株豎直培養(yǎng)
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 轉(zhuǎn)基因煙草葉片表型試驗(yàn)
        3.4.2 干旱脅迫種子萌發(fā)試驗(yàn)
        3.4.3 轉(zhuǎn)基因煙草植株豎直培養(yǎng)
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第4章 轉(zhuǎn)Ms YSL6、Ms YSL7 煙草對(duì)金屬脅迫的響應(yīng)
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 植物材料
        4.2.2 主要儀器設(shè)備
        4.2.3 主要試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 銅脅迫處理轉(zhuǎn)基因煙草
        4.3.2 鎘脅迫處理轉(zhuǎn)基因煙草
        4.3.3 葉綠素含量測(cè)定
        4.3.4 組織化學(xué)染色
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 銅脅迫分析
        4.4.2 鎘脅迫分析
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
第5章 肇東苜蓿組織培養(yǎng)體系的建立
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 植物材料
        5.2.2 主要儀器設(shè)備
        5.2.3 主要試劑
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 無(wú)菌苗的培養(yǎng)
        5.3.2 外植體的獲得
        5.3.3 愈傷組織的誘導(dǎo)
        5.3.4 不定芽的分化
        5.3.5 生根培養(yǎng)
        5.3.6 數(shù)據(jù)分析
    5.4 結(jié)果
        5.4.1 不同處理對(duì)肇東苜蓿愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        5.4.2 肇東苜蓿愈傷組織的分化
        5.4.3 生根
    5.5 討論
    5.6 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3778932