背景:額顳葉癡呆(Frontotemporal disease,FTD)是一種常染色體顯性遺傳的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,臨床上以隱匿起病、逐漸進展的精神行為異常,執(zhí)行功能損害和(或)語言障礙為特征。FTD也是僅次于阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)的第二常見的早發(fā)性癡呆。根據(jù)典型的臨床表現(xiàn)可分為行為變異型額顳葉癡呆(bv FTD),語義性癡呆(SD)和進行性非流利性失語(PNFA)三種臨床類型。多達15%的FTD患者合并運動神經(jīng)元病。約40%的FTD患者具有確切的陽性癡呆家族史,但僅有10%的患者具有明確的常染色體顯性遺傳模式。目前已經(jīng)證實FTD至少有8種致病基因,分別是MAPT、C9ORF72、GRN、TBK1、CHMP2B、FUS、VCP、TARDBP等。其中MAPT是最早發(fā)現(xiàn)的FTD的致病基因。迄今為止,總共在160個家系發(fā)現(xiàn)了57個MAPT致病變異。而我國FTD患者的致病基因變異報道較少,因此有必要進一步明確我國漢族FTD患者的致病基因變異譜,尤其是MAPT基因變異譜。目的:篩查并確認我國FTD患者的致病基因變異,探討致病變異特點及其與臨床表型的關(guān)系。方法:2...

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【學(xué)位級別】：碩士

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致謝
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縮略詞表
引言
1 研究內(nèi)容和方法
    1.1 研究對象
        1.1.1 研究對象及樣本收集
        1.1.2 病例納入標準
    1.2 主要實驗材料與試劑
        1.2.1 細胞系、菌種和質(zhì)粒
        1.2.2 主要試劑
        1.2.3 主要儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 血液標本采集
        1.3.2 基因組DNA抽提及濃度測定
        1.3.3 APOE基因檢測
        1.3.4 全外顯子測序流程
        1.3.5 全外顯子測序變異位點分析
        1.3.6 全外顯子測序變異位點Sanger測序和家系成員一代驗證
        1.3.7 定點誘變構(gòu)建突變型MAPT表達質(zhì)粒
        1.3.8 去內(nèi)毒素質(zhì)粒中量抽提
        1.3.9 HEK293T和 PC12 細胞系培養(yǎng)
        1.3.10 細胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        1.3.11 蛋白印記實驗(Western blot)
        1.3.12 細胞免疫熒光檢測
        1.3.13 重組蛋白表達與純化實驗流程
        1.3.14 白細胞RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
        1.3.15 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 入組病人臨床特點
    2.2 全外顯子測序變異位點結(jié)果分析
    2.3 攜帶MAPT和 GRN變異病人的臨床特征
    2.4 東亞人群報道的MAPT基因致病性質(zhì)不明的變異
    2.5 MAPT基因新變異對Tau蛋白磷酸化水平的影響
    2.6 Tau蛋白磷酸化表現(xiàn)為特定位點的改變
    2.7 p.R406Q和 p.D430H變異不影響tau與微管結(jié)合
    2.8 MAPT變異對微管組裝的影響
    2.9 MAPT變異對肝素鈉誘導(dǎo)tau蛋白自身聚集的影響
    2.10 GRN基因外顯子跳躍及m RNA水平
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
綜述 MAPT基因變異和相關(guān)神經(jīng)變性病的研究進展
    參考文獻
作者簡歷



本文編號：3763099