目的:探討胞苷脫氨酶（CDA）基因沉默在治療人慢性髓系白血�。–ML）中的潛在價值。方法:通過RT-PCR和Western blot檢測CML患者和造血干細(xì)胞移植供體的骨髓單個核細(xì)胞中的CDA表達(dá)。對CML KCL-22細(xì)胞系轉(zhuǎn)染shRNA和過表達(dá)CDA的p BS/U6-Neo質(zhì)粒來誘導(dǎo)CDA基因沉默或過表達(dá)。通過細(xì)胞計數(shù)試劑盒8（CCK-8）測定和細(xì)胞集落形成實驗評價細(xì)胞增殖,通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。此外,將0.2 m L不同處理的細(xì)胞懸浮液（106個細(xì)胞/m L）注射到裸鼠中建立裸鼠腫瘤異種移植模型。結(jié)果:與造血干細(xì)胞移植供體相比,CML患者的骨髓單個核細(xì)胞中的CDA m RNA和蛋白表達(dá)顯著升高（P ＜0.05）。轉(zhuǎn)染shRNA-CDA顯著降低了KCL-22細(xì)胞的細(xì)胞活力和細(xì)胞集落數(shù)（P＜0.05）。與對照組（4.32%）相比,shRNA-CDA組（13.45%）的細(xì)胞凋亡率顯著升高（P＜0.05）。與對照組相比,shRNA-CDA組的BCL-2蛋白表達(dá)水平顯著降低,而cleaved caspase-3顯著升高（P＜0.05）。與對照組相比,shRNA-CDA組的PI3K蛋白... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 CDA基因沉默和CDA過表達(dá)模型的構(gòu)建
        1.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.2.4 細(xì)胞活力測定
        1.2.5細(xì)胞集落形成實驗
        1.2.6 細(xì)胞凋亡測定
        1.2.7 RT-PCR
        1.2.8 蛋白質(zhì)印跡分析
        1.2.9 裸鼠腫瘤異種移植
    1.3 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
    2.1 CML患者的骨髓單個核細(xì)胞中CDA m RNA和蛋白表達(dá)升高
    2.2 CDA基因沉默抑制細(xì)胞增殖
    2.3 CDA基因沉默誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
    2.4 CDA基因沉默通過抑制PI3K/Akt信號通路發(fā)揮抗癌作用
    2.5 CDA基因沉默抑制腫瘤生長
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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