發(fā)布時間：2022-10-19 13:47

　　目的:研究食管鱗癌Eca109細(xì)胞中,Survivin是否參與TNF-α誘導(dǎo)PD-L1表達(dá)增高,初步確定與PD-L1表達(dá)相關(guān)的信號通路;明確以上信號通路蛋白細(xì)胞外泌體中含量的變化。方法:1)選用腫瘤壞死因子α（TNF-α）誘導(dǎo)食管鱗癌細(xì)胞Eca109,使PD-L1表達(dá)增高;2)通過ERK、MEK、JNK、PI3K/AKT、STAT3、PKA、PKC、Hedgehog、CaMK2信號通路抑制劑SCH772984、PD98059、SP600125、LY294002、AG490、H89、Staurosporine、Vismodegib、KN62干預(yù)Eca109細(xì)胞1.5、3、6、12、24小時,篩選TNF-α誘導(dǎo)PD-L1高表達(dá)的主要細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路;3)使用Flag-Survivin過表達(dá)載體、Survivin的抑制劑YM155及篩選的主要信號傳導(dǎo)通路抑制劑對Eca109細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)3、12、24小時;4)收集不同處理組中的細(xì)胞培養(yǎng)基上清,采用超高速離心法提取外泌體。本實驗中選用免疫印跡Western blot蛋白電泳方法檢測抑制劑干預(yù)后相關(guān)信號通路的相關(guān)基因ERK、MEK、JNK、PI... 

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照表
摘要
Abstract
前言
研究內(nèi)容與方法
    1 實驗材料及設(shè)備
        1.1 實驗材料
        1.2 試劑設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞實驗
        2.2 感受態(tài)細(xì)菌轉(zhuǎn)化
        2.3 質(zhì)粒抽提
        2.4 脂質(zhì)體電轉(zhuǎn)染
        2.5 PD-L1 高表達(dá)模型建立
        2.6 細(xì)胞凋亡
        2.7 免疫印跡(Western blot)
        2.8 外泌體的提取
    3 質(zhì)量控制
        3.1 樣本控制
        3.2 實驗技術(shù)
        3.3 儀器質(zhì)控
    4 統(tǒng)計方法
    5 技術(shù)路線
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
導(dǎo)師評閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腫瘤來源的外泌體誘導(dǎo)腫瘤免疫逃逸研究[J]. 張雯,李瑞琛,宋淑霞.  河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2019(08)
[2]Survivin和PCAF在食管癌組織中的表達(dá)以及臨床意義[J]. 梁宗英,侯繼申,張樂,張志民,趙寶山,孫光蕊,辛國華.  中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新. 2019(20)
[3]PD-L1表達(dá)調(diào)控機(jī)制及其對抗腫瘤免疫反應(yīng)的影響[J]. 朱凌曦,安華章.  中國腫瘤生物治療雜志. 2017(04)
[4]食管癌細(xì)胞來源的外泌體對腫瘤細(xì)胞遷移及侵襲能力的影響及機(jī)制研究[J]. 林鋒,王海娟,李春曉,李慧,王婷,南鵬,錢海利,詹啟敏.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
[5]運用抗PD-L1抗體治療晚期癌癥患者的安全性與療效評價[J]. 姜孝新,Julie R.Brahmer,Scott S.Tykodi,Laura Q.M.Chow.  腫瘤藥學(xué). 2012(03)
[6]Survivin調(diào)控相關(guān)基因在新疆哈薩克族食管癌中的表達(dá)[J]. 郭文佳,張麗萍,王洪江,李卉,龐作良,李惠武.  癌變·畸變·突變. 2011(04)
[7]MicroRNA signatures in liver diseases[J]. Xian-Ming Chen, Department of Medical Microbiology and Immunology, Creighton University Medical Center, CrissⅡ Room 529, 2500 California Plaza, Omaha, NE 68178,United States.  World Journal of Gastroenterology. 2009(14)



本文編號：3693475