露地菊PIP1/2基因的遺傳轉化及抗鹽性驗證
發(fā)布時間:2022-08-12 20:37
露地菊是北方重要的園林綠化花卉之一,具有管理粗放、植株矮小、花色繁多等特點。質膜內在蛋白(Plasma membrane intrinsic proteins,PIPs)作為水孔蛋白超家族MIP家族的一員,能夠調節(jié)植物細胞間水分平衡,參與滲透脅迫應答,調節(jié)氣孔運動,在植物抗逆境脅迫中起到重要的作用。為研究露地菊CmPIP1和CmPIP2基因功能,選取了東北林業(yè)大學生命科學學院花卉生物工程研究所選育的五種露地菊:’粉紗裙’、’金秋’、’紫濤’、’火焰’、’粉佳人’,在不同NaCl濃度培養(yǎng)下,探尋不同植株的抗鹽能力,及葉片中Na+、K+的含量和CmPIP1/2基因相對表達量的關系。同時研究CmPIP1和CmPIP2在露地菊’火焰’中的表達特性。利用實驗室已構建的CmPIP1和CmPIP2的過表達和干涉載體,通過農桿菌侵染的方法,獲得CmPIP1和CmPIP2的過表達和干涉露地菊’火焰’轉基因植株,并對轉基因植株進行抗鹽性驗證,為培育出抗鹽能力更強的露地菊新品系提供有力的分子基礎,豐富鹽堿地區(qū)花卉種植品種。本研究的主要結果如下:1.露地菊’粉紗裙’、’金秋’、’紫濤’、’火焰’、’粉佳人’分...
【文章頁數】:46 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 露地菊研究概況
1.2 PIP基因的研究進展
1.3 植物抗性研究
1.4 本研究的目的和意義
2 五種露地菊抗鹽性比較及與CmPIP表達量的相關性分析
2.1 材料與試劑
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑
2.2 試驗方法
2.2.1 五種露地菊Na+和K+含量的測定
2.2.2 五種露地菊中CmPIP1和CmPIP2基因相對表達量分析
2.2.2.1 露地菊葉片總RNA的提取
2.2.2.2 Real-Time PCR反應測定CmPIP1和CmPIP2的相對表達量
2.3 結果與分析
2.3.1 五種露地菊Na~+和K~+含量的測定
2.3.2 五種露地菊K~+/Na~+含量比值與CmPIP表達量的相關性
2.4 討論
2.5 本章小結
3 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因表達特性分析
3.1 材料與試劑
3.2 試驗方法
3.2.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
3.2.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
3.3 結果與分析
3.3.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
3.3.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
3.4 討論
3.5 本章小結
4 CmPIP遺傳轉化露地菊及抗鹽性驗證
4.1 材料與試劑
4.1.1 試驗材料
4.1.2 試驗試劑
4.2 試驗方法
4.2.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉化露地菊
4.2.2 轉基因植株的鑒定
4.2.3 MDA含量測定
4.2.4 轉基因植株表型鑒定
4.3 結果與分析
4.3.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉化露地菊
4.3.2 轉基因植株的鑒定
4.3.3 鹽脅迫下轉基因植株MDA含量測定
4.3.4 轉基因植株表型鑒定
4.4 討論
4.5 本章小結
結論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]非生物逆境對植物水孔蛋白表達調控的研究進展[J]. 王文鋮,崔克輝. 植物生理學報. 2016(04)
[2]植物抗旱耐鹽機理的研究進展[J]. 胡興旺,金杭霞,朱丹華. 中國農學通報. 2015(24)
[3]植物耐鹽堿基因工程研究進展[J]. 郭文芳,農萬廷,李剛強,劉德虎. 生物技術通報. 2015(07)
[4]植物耐寒生理及蛋白質組學研究進展[J]. 安飛飛,李庚虎,陳霆,林立銘,歐文軍. 中國農學通報. 2015(14)
[5]逆境條件下水孔蛋白PIPs作用的研究進展[J]. 孫天旭,李玉花,張旸. 植物生理學報. 2014(06)
[6]胡楊谷胱甘肽過氧化物酶PeGPX基因的克隆及轉化植株耐鹽性分析[J]. 王菲菲,丁明全,鄧澍榮,王美娟,孫健,侯佩臣,馬旭君,張玉紅,趙楠,沈昕,陳少良. 基因組學與應用生物學. 2012(03)
[7]Proteomic analysis of seed germination under salt stress in soybeans[J]. Xiao-yan XU1,2, Rui FAN1, Rui ZHENG1,3, Chun-mei LI1, De-yue YU 1 (1National Center for Soybean Improvement, National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China) (2Foundation Department, Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry, Jurong 212400, China) (3College of Life Sciences, Ningxia University, Yinchuan 750021, China). Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2011(07)
[8]植物水孔蛋白最新研究進展[J]. 李紅梅,萬小榮,何生根. 生物化學與生物物理進展. 2010(01)
[9]菊花種質資源研究進展[J]. 張莉俊,戴思蘭. 植物學報. 2009(05)
[10]德抗961小麥耐鹽生理特性研究[J]. 梁超,王超,楊秀風,張秀田,王瑋. 西北植物學報. 2006(10)
博士論文
[1]花特異嵌合啟動子功能分析及百合ACO RNAi遺傳轉化[D]. 杜靈娟.西北農林科技大學 2013
碩士論文
[1]過表達AtTIP和AtNHX基因對擬南芥耐鹽性的影響[D]. 劉倩.曲阜師范大學 2016
[2]野生毛葡萄質膜水通道蛋白基因的克隆與功能驗證[D]. 顏培玲.貴州大學 2015
[3]露地菊品種‘紫秋裳’再生及遺傳轉化體系的建立[D]. 高曉霞.東北林業(yè)大學 2014
[4]根癌農桿菌介導PCFH基因轉化菊花的研究[D]. 王歡.北京林業(yè)大學 2007
[5]利用農桿菌介導法將類胡蘿卜素合成酶基因LycB導入番茄、菊花的研究[D]. 任永霞.中國人民解放軍軍需大學 2003
本文編號:3676556
【文章頁數】:46 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 露地菊研究概況
1.2 PIP基因的研究進展
1.3 植物抗性研究
1.4 本研究的目的和意義
2 五種露地菊抗鹽性比較及與CmPIP表達量的相關性分析
2.1 材料與試劑
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑
2.2 試驗方法
2.2.1 五種露地菊Na+和K+含量的測定
2.2.2 五種露地菊中CmPIP1和CmPIP2基因相對表達量分析
2.2.2.1 露地菊葉片總RNA的提取
2.2.2.2 Real-Time PCR反應測定CmPIP1和CmPIP2的相對表達量
2.3 結果與分析
2.3.1 五種露地菊Na~+和K~+含量的測定
2.3.2 五種露地菊K~+/Na~+含量比值與CmPIP表達量的相關性
2.4 討論
2.5 本章小結
3 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因表達特性分析
3.1 材料與試劑
3.2 試驗方法
3.2.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
3.2.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
3.3 結果與分析
3.3.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
3.3.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
3.4 討論
3.5 本章小結
4 CmPIP遺傳轉化露地菊及抗鹽性驗證
4.1 材料與試劑
4.1.1 試驗材料
4.1.2 試驗試劑
4.2 試驗方法
4.2.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉化露地菊
4.2.2 轉基因植株的鑒定
4.2.3 MDA含量測定
4.2.4 轉基因植株表型鑒定
4.3 結果與分析
4.3.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉化露地菊
4.3.2 轉基因植株的鑒定
4.3.3 鹽脅迫下轉基因植株MDA含量測定
4.3.4 轉基因植株表型鑒定
4.4 討論
4.5 本章小結
結論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]非生物逆境對植物水孔蛋白表達調控的研究進展[J]. 王文鋮,崔克輝. 植物生理學報. 2016(04)
[2]植物抗旱耐鹽機理的研究進展[J]. 胡興旺,金杭霞,朱丹華. 中國農學通報. 2015(24)
[3]植物耐鹽堿基因工程研究進展[J]. 郭文芳,農萬廷,李剛強,劉德虎. 生物技術通報. 2015(07)
[4]植物耐寒生理及蛋白質組學研究進展[J]. 安飛飛,李庚虎,陳霆,林立銘,歐文軍. 中國農學通報. 2015(14)
[5]逆境條件下水孔蛋白PIPs作用的研究進展[J]. 孫天旭,李玉花,張旸. 植物生理學報. 2014(06)
[6]胡楊谷胱甘肽過氧化物酶PeGPX基因的克隆及轉化植株耐鹽性分析[J]. 王菲菲,丁明全,鄧澍榮,王美娟,孫健,侯佩臣,馬旭君,張玉紅,趙楠,沈昕,陳少良. 基因組學與應用生物學. 2012(03)
[7]Proteomic analysis of seed germination under salt stress in soybeans[J]. Xiao-yan XU1,2, Rui FAN1, Rui ZHENG1,3, Chun-mei LI1, De-yue YU 1 (1National Center for Soybean Improvement, National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China) (2Foundation Department, Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry, Jurong 212400, China) (3College of Life Sciences, Ningxia University, Yinchuan 750021, China). Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2011(07)
[8]植物水孔蛋白最新研究進展[J]. 李紅梅,萬小榮,何生根. 生物化學與生物物理進展. 2010(01)
[9]菊花種質資源研究進展[J]. 張莉俊,戴思蘭. 植物學報. 2009(05)
[10]德抗961小麥耐鹽生理特性研究[J]. 梁超,王超,楊秀風,張秀田,王瑋. 西北植物學報. 2006(10)
博士論文
[1]花特異嵌合啟動子功能分析及百合ACO RNAi遺傳轉化[D]. 杜靈娟.西北農林科技大學 2013
碩士論文
[1]過表達AtTIP和AtNHX基因對擬南芥耐鹽性的影響[D]. 劉倩.曲阜師范大學 2016
[2]野生毛葡萄質膜水通道蛋白基因的克隆與功能驗證[D]. 顏培玲.貴州大學 2015
[3]露地菊品種‘紫秋裳’再生及遺傳轉化體系的建立[D]. 高曉霞.東北林業(yè)大學 2014
[4]根癌農桿菌介導PCFH基因轉化菊花的研究[D]. 王歡.北京林業(yè)大學 2007
[5]利用農桿菌介導法將類胡蘿卜素合成酶基因LycB導入番茄、菊花的研究[D]. 任永霞.中國人民解放軍軍需大學 2003
本文編號:3676556
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