胭脂魚（Myxocyprinus asiaticus）屬鯉形目（Cypriniformes）胭脂魚科（Catostomidae）,僅分布于我國長江和閩江,是我國特有的淡水珍稀物種。胭脂魚體型奇特、色彩絢麗、味道鮮美,具有很高的觀賞和食用價值。胭脂魚是我國長江流域的重要經(jīng)濟(jì)魚類,但是由于近些年人類活動的頻繁導(dǎo)致其數(shù)量驟降,其生境一度面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),通過科學(xué)的人工繁殖放流已使得其數(shù)量得到穩(wěn)步的回升。人工繁殖成為保護(hù)胭脂魚這一種群的重要途徑。但是隨著人工養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大,其面臨的病害也隨之增加,造成較高的死亡率,這是目前胭脂魚人工養(yǎng)殖中面臨的一大困境。我們試圖從胭脂魚的免疫系統(tǒng)中的細(xì)胞因子入手,希望為解決胭脂魚人工繁殖中存在的困境提供理論依據(jù)和解決措施。細(xì)胞因子是一群相對分子量較小的蛋白,活性極高,產(chǎn)生的時間短暫,通常通過自分泌或旁分泌的形式發(fā)揮作用。細(xì)胞因子作為免疫系統(tǒng)中一類重要的傳導(dǎo)信號的分子,是免疫細(xì)胞間信號網(wǎng)絡(luò)的組成部分,在炎癥反應(yīng)、防御病毒感染、特異性T、B細(xì)胞克隆的增殖及其功能等方面起作用。腫瘤壞死因子配體超家族在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)中起到了關(guān)鍵作用,這些配體中的大多數(shù)是典型的Ⅱ型跨膜蛋... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 BAFF的研究進(jìn)展
        1.1.1 BAFF的結(jié)構(gòu)與分布
        1.1.2 BAFF的受體及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.1.3 BAFF與相關(guān)疾病
        1.1.4 BAFF在魚類中的研究進(jìn)展
    1.2 魚類細(xì)胞因子的研究進(jìn)展
    1.3 細(xì)胞因子類藥物的研究進(jìn)展
    1.4 胭脂魚的研究現(xiàn)狀
    1.5 研究的目的與意義
    1.6 研究內(nèi)容
第2章 胭脂魚BAFF基因的克隆與生物信息學(xué)分析
    2.1 引言
    2.2 實驗材料和儀器
        2.2.1 實驗動物
        2.2.2 實驗菌株
        2.2.3 實驗試劑與器材
    2.3 實驗方法
        2.3.1 脾臟總RNA的提取與cDNA的合成
        2.3.2 大腸桿菌Top10感受態(tài)細(xì)胞的制備
        2.3.3 胭脂魚BAFF分子核心序列的擴(kuò)增
        2.3.4 RACE-PCR擴(kuò)增3′和5′核苷酸序列
        2.3.5 胭脂魚BAFF全長拼接
        2.3.6 胭脂魚BAFF序列的生物信息學(xué)分析
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 胭脂魚BAFFcDNA全長
        2.4.2 胭脂魚BAFFcDNA生物信息學(xué)分析結(jié)果
    2.5 討論
第3章 胭脂魚BAFF表達(dá)模式研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料和儀器
        3.2.1 實驗動物
        3.2.2 實驗菌株
        3.2.3 實驗試劑及儀器
        3.2.4 有關(guān)試劑的配制
    3.3 實驗方法
        3.3.1 胭脂魚BAFF組織分布和發(fā)育時期檢測
        3.3.2 原位雜交分析胭脂魚外周血白細(xì)胞BAFF的表達(dá)
        3.3.3 嗜水氣單胞菌感染后對胭脂魚BAFF和IgM表達(dá)變化的影響
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 GAPDH、β-actin、L18a、18srRNA四個候選內(nèi)參基因的穩(wěn)定性評估
        3.4.2 胭脂魚BAFF組織表達(dá)分析
        3.4.3 胭脂魚BAFF早期發(fā)育階段檢測
        3.4.4 原位雜交分析胭脂魚外周白細(xì)胞BAFF表達(dá)結(jié)果
        3.4.5 嗜水氣單胞菌感染后BAFF和IgM表達(dá)變化情況
    3.5 討論
第4章 胭脂魚BAFF重組蛋白的表達(dá)、純化和功能檢測
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 實驗菌株和載體
        4.2.2 實驗試劑及儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 RT-PCR擴(kuò)增MasBAFF基因及PCR產(chǎn)物的回收和鑒定
        4.3.2 重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
        4.3.3 重組蛋白的表達(dá)、純化與鑒定
        4.3.4 胭脂魚BAFF重組蛋白的功能檢測
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 SDS-PAGE分析鑒定誘導(dǎo)表達(dá)結(jié)果
        4.4.2 MasBAFF蛋白與胭脂魚外周血白細(xì)胞的結(jié)合
        4.4.3 MasBAFF蛋白對體外培養(yǎng)胭脂魚外周血白細(xì)胞的活性影響
    4.5 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表文章
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胭脂魚主要病害的臨床診斷及治療技術(shù)[J]. 田甜.  水產(chǎn)科技情報. 2018(01)
[2]BAFF受體在人B淋巴瘤細(xì)胞中的作用研究[J]. 王永倫,封忠昕,葛曉軍.  中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2017(20)
[3]B細(xì)胞刺激因子相關(guān)疾病及其抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 吳海濤,宋毅榮,盧楠,葉嘉鵬,戴佳韻,姚韻.  中國新藥與臨床雜志. 2015(08)
[4]B細(xì)胞激活因子與靶向治療[J]. 張丹,瞿愛東.  國際生物制品學(xué)雜志. 2015 (02)
[5]實時定量PCR構(gòu)建法夫酵母內(nèi)參基因β-actin、gpd、18S rRNA標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒和標(biāo)準(zhǔn)曲線[J]. 李天麗,鄭晨華,李利君,倪輝,蔡慧農(nóng).  激光生物學(xué)報. 2013(04)
[6]B淋巴細(xì)胞刺激因子及其受體介導(dǎo)的免疫細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J]. 秦瓊,常艷,吳育晶,魏偉.  中國藥理學(xué)通報. 2011(05)
[7]重慶市胭脂魚資源及保護(hù)現(xiàn)狀[J]. 甘小平,熊娟,王志堅.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(10)
[8]實時熒光定量PCR中內(nèi)參基因的選擇[J]. 趙文靜,徐潔,包秋華,陳永福,張和平.  微生物學(xué)通報. 2010(12)
[9]內(nèi)參基因在實時定量PCR中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 董曉麗,王加啟,卜登攀,張春林,李珊珊,趙國琦.  中國畜牧獸醫(yī). 2009(09)
[10]BAFF、MRP和PD-L2在大腸癌中的表達(dá)及其意義研究[J]. 夏軍強(qiáng),拉萊·蘇祖克,陳曉,馬紅,崔文麗.  河北職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2008(02)

碩士論文
[1]條紋斑竹鯊和鯽魚BAFF基因的克隆和性質(zhì)分析[D]. 龐書英.南京師范大學(xué) 2011
[2]BAFF受體TACI融合蛋白的表達(dá)純化與功能研究[D]. 孟祥斌.天津大學(xué) 2010
[3]B細(xì)胞刺激因子受體（BAFF-R）的基因克隆、表達(dá)與功能研究[D]. 田俠.河北大學(xué) 2006
[4]重組人可溶性B淋巴細(xì)胞刺激因子的制備及功能鑒定[D]. 高會廣.第三軍醫(yī)大學(xué) 2003



本文編號：3639849