草酸被認(rèn)為是核盤菌的主要致病因子,在病原菌的侵染過程中發(fā)揮著重要作用,并與核盤菌的致病力密切相關(guān),為研究轉(zhuǎn)盾殼霉草酸脫酸酶基因Cmoxdc1對(duì)大豆菌核病抗性的促進(jìn)作用,本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法,將來源于核盤菌生防菌盾殼霉（Coniothyrium minitans）的Cmoxdc1基因?qū)氪蠖垢胁∑贩NJack,研究轉(zhuǎn)Cmoxdc1基因大豆對(duì)草酸耐受性和菌核病抗性。結(jié)果表明:外源基因以低拷貝形式（1～2個(gè)）整合至大豆基因組,并能夠完成轉(zhuǎn)錄。對(duì)離體葉片進(jìn)行60 mmol·L^-1草酸處理后,轉(zhuǎn)基因植株葉片病斑面積顯著低于對(duì)照受體品種,接種7 d后病斑面積較受體對(duì)照減少88.80%～89.98%。離體葉柄和葉片接種核盤菌后,轉(zhuǎn)基因大豆病斑擴(kuò)展受到明顯抑制,病斑長(zhǎng)度和病斑面積均顯著低于對(duì)照受體。接種4 h后,葉柄病斑長(zhǎng)度為對(duì)照品種的41.38%～43.51%;接種7 d后,葉片病斑面積為對(duì)照品種的8.68%～27.01%;并且,接種核盤菌后轉(zhuǎn)基因葉片中的草酸含量也較對(duì)照品種顯著降低。研究結(jié)果表明盾殼霉Cmoxdc1表達(dá)顯著增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)草酸的耐受性和對(duì)菌核病的抗性。 

【文章來源】：大豆科學(xué). 2020,39(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 植物表達(dá)載體構(gòu)建及大豆遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.2 外源基因整合及表達(dá)分析
        1.2.3 草酸耐受性分析及接種核盤菌后葉片草酸含量檢測(cè)
        1.2.4 核盤菌接種鑒定
        1.2.5 轉(zhuǎn)基因植株農(nóng)藝性狀調(diào)查
    1.3 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 轉(zhuǎn)基因大豆的獲得及檢測(cè)
    2.2 外源基因整合及表達(dá)分析
    2.3 轉(zhuǎn)基因大豆草酸耐受性分析及草酸含量分析
    2.4 轉(zhuǎn)基因大豆抗菌核病鑒定
    2.5 轉(zhuǎn)基因植株性狀分析
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]野生大豆種質(zhì)資源對(duì)大豆菌核病抗性評(píng)價(jià)[J]. 董利東,王金生,吳俊江,李文濱,邱麗娟,常汝鎮(zhèn),徐鵬飛,張淑珍.  大豆科學(xué). 2014(06)
[2]大豆菌核病鑒定方法比較及分析[J]. 孫明明,韓英鵬,陳浩,滕衛(wèi)麗,李文濱.  大豆科學(xué). 2007(05)
[3]大豆菌核病的識(shí)別與綜合防治[J]. 趙丹,許艷麗,李春杰.  大豆通報(bào). 2006(03)
[4]小品牌困境及對(duì)策[J]. 青平.  科技進(jìn)步與對(duì)策. 2003(01)

博士論文
[1]盾殼霉草酸脫羧酶基因的克隆、功能驗(yàn)證及生防作用研究[D]. 曾麗梅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3634701