利用農(nóng)桿菌介導的子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化體系,將Cry1Ac/Ab融合抗蟲基因表達載體導入栽培大豆品種GP03-8-23中,通過Cry1Ac/Ab融合基因在大豆中的表達,獲得了抗蟲轉(zhuǎn)基因大豆新材料。試驗共轉(zhuǎn)化子葉節(jié)外植體1 540個,再生轉(zhuǎn)化苗經(jīng)PCR、Southern雜交和Bar試紙條檢測,獲得85株陽性轉(zhuǎn)基因植株,平均轉(zhuǎn)化率為5.47%。利用實時熒光定量PCR技術（qRT-PCR）檢測了目標基因在轉(zhuǎn)基因大豆不同株系及不同組織中的表達量。結(jié)果表明:不同轉(zhuǎn)基因株系表達量存在顯著差異,目標基因在大豆根、莖、葉、子粒中均有表達,在葉中的表達量最高,根中的表達量較高,莖和子粒中的表達量最低。經(jīng)室內(nèi)抗食葉性害蟲離體鑒定,獲得抗蟲性較好的T1代轉(zhuǎn)Cry1Ac/Ab基因大豆材料,其中1份表現(xiàn)為高抗,抗蟲性顯著優(yōu)于對照,可為培育抗蟲大豆新品系提供新的種質(zhì)材料。 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學學報. 2017,39(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 基因及載體
        1.1.3 檢測引物
    1.2 方法
        1.2.1 植物表達載體p B7RWG-Cry1Ac/Ab在大豆中的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.2 轉(zhuǎn)化植株的分子生物學檢測
    1.3 轉(zhuǎn)基因大豆抗食葉性害蟲的離體鑒定
2 結(jié)果與分析
    2.1 農(nóng)桿菌介導法獲得轉(zhuǎn)Cry1Ac/Ab融合基因大豆植株
    2.2 轉(zhuǎn)化植株的分子生物學檢測
    2.3 轉(zhuǎn)基因植株的Southern blot檢測
    2.4 T1代轉(zhuǎn)Cry1Ac/Ab融合基因大豆目標基因相對表達情況的分析
    2.5 轉(zhuǎn)基因植株抗食葉性害蟲的離體鑒定
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3634406