目的1.研究ABATmRNA和蛋白在腎透明細(xì)胞癌和正常腎組織中的表達水平,探索ABAT表達與腎癌的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后的關(guān)系;2.研究ABAT對腎癌細(xì)胞增殖、遷移和代謝的影響。方法1.運用數(shù)據(jù)庫挖掘預(yù)測ABAT在腎透明細(xì)胞癌中表達情況。2.采用qRT-PCR檢測50對腎透明細(xì)胞癌及癌旁正常腎組織中ABAT mRNA的表達水平。3.通過免疫組化實驗分析25對腎透明細(xì)胞癌及其癌旁正常腎組織中ABAT蛋白表達情況。4.利用TCGA數(shù)據(jù)庫臨床數(shù)據(jù)分析ABAT表達水平對腎透明細(xì)胞癌患者臨床預(yù)后的影響。5.運用ABAT過表達載體慢病毒轉(zhuǎn)染腎癌ACHN、786-0細(xì)胞,建立ABAT過表達ACHN和786-0穩(wěn)定細(xì)胞系。6.采用qRT-PCR和Western Blot鑒定ACHN、786-0的空載和ABAT穩(wěn)定過表達細(xì)胞系。7.通過WST-1方法檢測過表達ABAT對ACHN、786-0細(xì)胞增殖的影響。8.運用平板克隆形成實驗分析ABAT過表達對ACHN與786-0細(xì)胞克隆形成能力的影響。9.使用Transwell實驗分析ABAT過表達對ACHN、786-0細(xì)胞遷移的影響。10.采用NADP/NADPH檢測... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２圖Ａ、Ｂ為癌旁正常組織，Ｃ、Ｄ為腎透明細(xì)胞癌組織，其中Ａ、Ｃ為５〇ｘ，??Ｂ、Ｄ為１００ｘ

Ｎ?Ｔ??圖１－２圖Ａ、Ｂ為癌旁正常組織，Ｃ、Ｄ為腎透明細(xì)胞癌組織，其中Ａ、Ｃ為５〇ｘ，??Ｂ、Ｄ為１００ｘ。圖Ｅ組織中ＡＢＡＴ蛋白高表達定義為陽性，低表達為陰性，腎??癌與癌旁組織差異明顯（；？＜０．０５）。??５．３?ＡＢＡＴ表達水平與腎透明細(xì)胞癌患者臨床病理資料的關(guān)系??根據(jù)５０對腎透明細(xì)胞癌組織中ＡＢＡＴ?ｍＲＮＡ的２＿ＡＡＣＴ值，來計算ＡＢＡＴｍＲＮＡ??的相對表達量，根據(jù)其將腫瘤樣本分為高表達組（２＿ＡＡＣＴ值＞０．５）與低表達組（２＿ＡＡＣＴ??值彡０．５）。探索ＡＢＡＴ?ｍＲＮＡ表達水平與患者臨床病理等數(shù)據(jù)之間的關(guān)系，如表??１－３。結(jié)果示：ＡＢＡＴ?ｍＲＮＡ表達水平與患者的年齡、性別、腫瘤大小、臨床分期??和病理分級無關(guān)，ｐ＞〇．〇５，無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。??１８??

計學(xué)分析??用ＳＰＳＳ２０．０統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理，所有計量資料均采用。統(tǒng)計結(jié)果ｐ＜〇．〇５作為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。??果??ＡＢＡＴ蛋白在各細(xì)胞系中表達水平分析及選擇細(xì)胞系??ｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ檢測ＡＢＡＴ蛋白在腎細(xì)胞及腎癌細(xì)胞中表達情況，結(jié)ＫＣ、ＨＥＫ２９３Ｔ人正常腎細(xì)胞系中ＡＢＡＴ蛋白表達水平高，而在腎癌８、７８６－０、ＡＣＨＮ和ＣＡＫｉ－１中ＡＢＡＴ表達低，與前文組織中表達情況２－１所示。在不同腎癌細(xì)胞系之間ＡＢＡＴ表達水平存在差異，選擇其性的ＡＣＨＮ、７８６－０作為后續(xù)實驗細(xì)胞系。??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ABAT基因在人類疾病中的研究進展[J]. 趙光杰,王小欽.  復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(03)
[2]中國部分市縣腎癌及泌尿系其他惡性腫瘤發(fā)病趨勢比較研究[J]. 馬建輝,李鳴,張思維,那彥群,陳萬青.  中華泌尿外科雜志. 2009 (08)

博士論文
[1]γ-氨基丁酸（GABA）代謝酶抑制劑的研究[D]. 陶云海.華中科技大學(xué) 2006



本文編號：3610049