目的:肝癌的發(fā)生發(fā)展是多基因參與、多步驟協(xié)同的復雜過程�，F(xiàn)有研究表明,男性是肝癌發(fā)生的獨立風險因素,但其具體機制尚不清楚。本研究旨在對Hras12V轉(zhuǎn)基因小鼠性別差異性肝腫瘤發(fā)生的蛋白質(zhì)組學進行分析,探究肝腫瘤發(fā)生發(fā)展性別依賴的分子機制。方法:通過對Hras12V原癌基因在肝細胞中的特異性表達誘導形成的轉(zhuǎn)基因肝癌小鼠模型進行研究,探索性別差異性肝腫瘤發(fā)生發(fā)展的蛋白質(zhì)組學的特點。1.對H-ras12V轉(zhuǎn)基因肝癌小鼠及正常C57BL/6J（10月齡雄性、10月齡雌性、15月齡雌性,各組9只,共計54只）小鼠進行剖檢,觀察和統(tǒng)計肝臟的病變情況;應用HE染色,檢測小鼠肝組織病理變化情況。2.對上述病理證實的正常小鼠肝組織及Hras12V小鼠肝腫瘤組織及腫瘤周圍組織（10月齡雄鼠和15月齡雌鼠）進行蛋白質(zhì)的提取。用Western blot方法檢測磷酸化絲裂原活化蛋白激酶（p-MEK）、磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（p-ERK1/2）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷酸化哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（p-m TOR）的蛋白水平。3.對上述病理證實的正常小鼠肝... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過MALDI-TOF/TOF-MS鑒定差異表達的蛋白質(zhì)點和初步分析

可能具有重要的作用。5. 鑒定結(jié)果的蛋白質(zhì)印跡驗證為了驗證 2D-DIGE 蛋白質(zhì)組學數(shù)據(jù)的真實性和重復性，隨機選取 7 個差異蛋白 HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 和 PRDX6，并重新選擇一組小鼠（正常非轉(zhuǎn)基因 10-M 和 15-F 小鼠，各 2 只；Hras12V 轉(zhuǎn)基因 10-M 和15-F 小鼠，各 3 只）進行蛋白質(zhì)印跡實驗對 2D-DIGE 結(jié)果進行驗證。在雌性和雄性小鼠中，HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 這六個蛋白的變化趨勢均與 2D-DIGE 結(jié)果一致。而 PRDX6 蛋白在雄性小鼠中變化趨勢與2D-DIGE 結(jié)果一致，而在雌鼠腫瘤組織中的表達水平較腫瘤周圍組織和正常組織較低，與 2D-DIGE 檢測上升趨勢不符。這表明 PRDX6 蛋白可能存在其他未檢測到的亞型（見圖 4）。上述結(jié)果表明，本研究中的 2D-DIGE 結(jié)果是真實可靠的。

大連醫(yī)科大學碩士學位論文 DHDH）、代謝（ATP5D 和 FDPS）、對缺氧的反應（UBQLN1）、DNA 填充（白 H4、組蛋白 H2AA 和組蛋白 H2AB）、DNA 修復（SLF2）、穩(wěn)態(tài)（PDIA6發(fā)育（TPM1）。雄性依賴下調(diào)的 3 種蛋白質(zhì)均被歸類為代謝（ALDH1L1、PG SCP2）。雌性依賴的下調(diào)蛋白主要參與代謝（ACOX1、AHCY 和 BHMT2）、化劑（GSTA3）、轉(zhuǎn)錄（BNC2）、細胞周期（CALM1）和發(fā)育（PFN1）。在雌上調(diào)的 3 種蛋白質(zhì)是 APOA4（運輸）、EEF2（翻譯）和 HSPA8（蛋白質(zhì)折疊雄性和雌性中反向調(diào)節(jié)的四種蛋白質(zhì)是 GPX1 和 PRDX6（抗氧化）、CYB5A（）和 HSPE1（蛋白質(zhì)折疊）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Sorafenib-based combined molecule targeting in treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Jian-Jun Gao,Zhen-Yan Shi,Ju-Feng Xia,Yoshinori Inagaki,Wei Tang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(42)



本文編號：3602059