口腔鱗狀細胞癌（OSCC）是一類極具破壞性且致命的惡性腫瘤,在所有頭頸部惡性腫瘤當中占有很大比例,已經(jīng)成為人類健康的一大殺手�？谇击[狀細胞癌因為其特殊的解剖位置,常嚴重影響患者的生存質量且多數(shù)預后不良。人們的日常不良習慣,如吸煙和飲酒等是癌癥轉移的危險因素,而腫瘤的轉移是癌癥患者面臨的一個嚴重問題。據(jù)統(tǒng)計,超過90%的癌癥相關死亡率是由于轉移。在口腔鱗狀細胞癌當中,有超過50%的病人出現(xiàn)淋巴結轉移,而這些患者的5年生存率顯著下降。人類激肽釋放酶基因家族（kallikrein,KLKs）是人類基因中最大的絲氨酸蛋白酶基因簇。KLKs是由15個不同基因編碼的絲氨酸蛋白酶,其定位于人類染色體19q13.4上,是一組高度保守的基因結構和蛋白質序列。KLKs在多個組織器官中表達。在許多生理過程中KLKs都扮演著重要角色。最近,KLKs被報道在腫瘤生長和轉移中發(fā)揮重要功能,并被認為是各種癌癥的生物標志物。許多KLKs在各種惡性腫瘤中表現(xiàn)出異常表達,被認為是疾病發(fā)展的預后標志。目前的研究表明,KLKs與口腔鱗狀細胞癌（OSCC）密切相關,涉及到腫瘤細胞的增殖、凋亡和轉移等諸多方面,而嚴重影響了人類的... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

KLKs促進惡性腫瘤侵襲和轉移的可能機制

圖 3.1 干擾質粒轉染后的口腔鱗癌細胞 KLK4 表達明顯降低通過實時定量 PCR 方法檢測 KLK4 表達水平發(fā)現(xiàn)，轉染了干擾片段和無關序列片段質粒的口腔鱗癌細胞的 KLK4 表達明顯降低，純細胞組和陰性對照組的 KLK4 表達無顯著異。分析結果顯示轉染了干擾片段的口腔鱗癌細胞的 KLK4 表達明顯降低，其沉默效率在 KB 細胞達到約 84%，而在 Tca-8113 細胞達到約 78%。三小結經(jīng)過設計合成 KLK4 基因的干擾片段和無關序列片段 (siRNA for KLK4：5′-AATCCGTGTCCGAGTCTGAC-3′)，并將上述片段分別構建至 pGCsi-H1 的質粒中，獲得 pGCsi-H1-KLK4 的干擾質粒和 pGCsi-H1-NC 的對照質粒，將質粒轉染口腔鱗癌細胞 KB、Tca-8113，用 G418 篩選，從而獲得了穩(wěn)定轉染pGCsi-H1-KLK4 的細胞系和對照細胞系；同時應用實時定量 PCR 的方法驗證了

圖 3.1 MTT 檢測各組細胞增殖能力通過 MTT 檢測可見 KLK4 基因干擾能夠顯著抑制口腔鱗癌細胞增殖能力，而純細胞組和陰性對照組的細胞增殖能力無顯著差異。二流式細胞術檢測細胞周期1 主要設備試劑1.1 主要設備表 2.1 實驗所用主要設備Tab2.1 Main equipments for the experiment設備名稱 生產(chǎn)企業(yè)超純水系統(tǒng) 香港 Heal Force超速冷凍離心機 長沙湖南湘儀


本文編號：3582040