背景:磺酰脲類降糖藥是目前非胰島素依賴型糖尿病治療中主要使用的降糖藥之一,雖然應(yīng)用廣泛,但其降糖療效和毒副作用呈現(xiàn)明顯的個(gè)體差異給臨床應(yīng)用帶來(lái)困擾和風(fēng)險(xiǎn)。OATP1B1、OATP1B3的基因多態(tài)性會(huì)影響轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能活性,CYP2C9的基因多態(tài)性也會(huì)導(dǎo)致酶的活性改變這是導(dǎo)致用藥個(gè)體差異的重要原因。已經(jīng)證實(shí)格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪是CYP2C9的底物,同時(shí)我們實(shí)驗(yàn)室前期研究表明格列美脲是OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)攝取底物,格列苯脲和格列吡嗪是OATP1B3轉(zhuǎn)運(yùn)攝取底物。那么格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝可能受其基因多態(tài)的影響,從而導(dǎo)致療效和毒副作用的個(gè)體差異出現(xiàn)。本課題研究目的在于探究轉(zhuǎn)運(yùn)體OATP1B1/1B3和代謝酶CYP2C9的基因多態(tài)性對(duì)格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的轉(zhuǎn)運(yùn)代謝之間的影響機(jī)制,為磺酰脲類降糖藥物能夠在臨床上得以更合理有效安全的應(yīng)用從而為實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的:通過(guò)建立CYP2C9*1、*2、*3重組酶模型和穩(wěn)定高表達(dá)的OATP1B1*1a、*5、*15以及OATP1B3、OATP1B3（344T>G）、OATP1B3（699G&g... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型CYP2C9中代謝差異研究
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器與設(shè)備
        2.1.2 藥品及試劑
    2.2 方法
        2.2.1 溶液的配制
        2.2.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪代謝孵育方法及樣品處理方法建立
        2.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在CYP2C9重組酶孵育體系中的LC-MS定量檢測(cè)
        2.2.4 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在各基因型CYP2C9重組酶中酶促動(dòng)力學(xué)反應(yīng)條件的探索
        2.2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 方法學(xué)專屬性
        2.3.2 重組酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪定量測(cè)定線性范圍的確定
        2.3.3 提取回收率
        2.3.4 準(zhǔn)確度與精密度
        2.3.5 不同基因型CYP2C9重組酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪酶促動(dòng)力學(xué)條件分析
        2.3.6 不同基因型CYP2C9重組酶對(duì)格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的酶促動(dòng)力學(xué)比較
    2.4 小結(jié)
第3章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B1/1B3細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)研究
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 主要儀器與設(shè)備
        3.1.3 主要藥品與試劑
    3.2 方法
        3.2.1 主要溶液配制
        3.2.2 HEK293T細(xì)胞培養(yǎng)及其生長(zhǎng)曲線的繪制
        3.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪對(duì)HEK293T細(xì)胞毒性測(cè)定
        3.2.4 BCA法測(cè)定HEK293T細(xì)胞裂解液蛋白含量
        3.2.5 細(xì)胞樣品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS檢測(cè)方法的建立
        3.2.6 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞中的攝取實(shí)驗(yàn)
        3.2.7 格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T細(xì)胞中的攝取實(shí)驗(yàn)
        3.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果
G), (699G>A)- HEK293T細(xì)胞的培養(yǎng)和生長(zhǎng)曲線繪制">        3.3.1 OATP1B1*1a,*5,*15-HEK293T和OATP1B3，(344T>G), (699G>A)- HEK293T細(xì)胞的培養(yǎng)和生長(zhǎng)曲線繪制
        3.3.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪對(duì)HEK293T細(xì)胞毒性測(cè)定結(jié)果分析
        3.3.3 HEK293T細(xì)胞裂解液蛋白曲線的繪制
        3.3.4 細(xì)胞樣品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS方法學(xué)測(cè)定分析
        3.3.5 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T攝取動(dòng)力學(xué)分析
        3.3.6 格列苯脲在不同基因型OATP1B3-HEK293T攝取動(dòng)力學(xué)分析
        3.3.7 格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T攝取動(dòng)力學(xué)分析
    3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3559579