目的:探討肝細(xì)胞表達(dá)CYP21A2對肝細(xì)胞線粒體氧化磷酸化的影響。方法:通過腺病毒轉(zhuǎn)染獲得穩(wěn)定傳代的CYP21A2HepG2細(xì)胞系,采用RNA干擾或外顯子啟動(dòng)CYP21A2基因在HepG2細(xì)胞系中的表達(dá),CYP21A2低表達(dá)HepG2組對照正常HepG2組、CYP21A2高表達(dá)HepG2組對照陰性HepG2組,提取RNA,進(jìn)行全基因組轉(zhuǎn)錄表達(dá)譜芯片檢測并差異性表達(dá)分析,生物信息學(xué)分析篩選各組肝細(xì)胞線粒體呼吸鏈差異表達(dá)基因,實(shí)時(shí)熒光定量驗(yàn)證。結(jié)果:CYP21A2基因沉默和過表達(dá)HepG2細(xì)胞線粒體呼吸鏈關(guān)鍵基因Ndufa2.Ndufa3均發(fā)生表達(dá)水平的顯著性改變,實(shí)時(shí)熒光定量驗(yàn)證結(jié)果顯示:正常對照組CYP21A2的Ndufa2表達(dá)為1.008±0.141,高于CYP21A2沉默組0.678±0.211(t=2.900,p<0.05);空載對照CYP21A2的Ndufa2表達(dá)為1.023±0.238,高于CYP21A2過表達(dá)組0.645±0.133(t=3.095,p<0.05);正常對照組CYP21A2的Ndufa3表達(dá)為1.009±0.145,高于CYP21A2沉默組0.7...

【文章來源】： 兵團(tuán)醫(yī)學(xué). 2020,18(02)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 試劑配制
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)基本操作方法
            1.2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
            1.2.2.2 細(xì)胞傳代
            1.2.2.3 細(xì)胞凍存
        1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.4 qRT-PCR驗(yàn)證基因表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]21-羥化酶缺乏導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)增生癥的研究進(jìn)展 [J]. 劉英華,陳瑛,王三男.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2014(12)



本文編號：3534153