發(fā)布時間：2021-11-25 04:38

　　以Poenibacillus polymyxa HY96-2為生物防治劑創(chuàng)制的微生物農(nóng)藥可以在田間有效防治番茄青枯病,但該菌防治青枯病的機制亟待進一步深入研究。良好的定殖能力是生防菌發(fā)揮防治作用的首要因素,形成生物膜是生防菌具有良好定殖能力的重要指征。另外,群體感應可以調(diào)控生物膜形成。本文旨在研究AI-2群體感應關鍵調(diào)控基因huxS對P.polymyxa HY96-2生物膜形成及其防治番茄青枯病能力的影響。本文構建了P.polymyxa HY96-2的luxS基因缺失株、回補株以及過表達株。通過構建LuxS蛋白的進化樹結果顯示P.polymyxa HY96-2 LuxS蛋白和其它益生菌的LuxS蛋白的同源性較高,并驗證了P.polymyxa HY96-2 LuxS蛋白可以誘導AI-2合成的活性。在離體和活體條件下評估了突變株及野生株形成生物膜的能力,結果表明,在離體及活體模型中l(wèi)uxS均正調(diào)控P.polymyxa HY96-2生物膜的形成。防治番茄青枯病的盆栽實驗結果表明,在發(fā)病前期、高峰期和后期,luxS缺失株的防效都最低（發(fā)病后期,防效只有50.70±1.39%）,luxS過表達株... 

【文章來源】：華東理工大學上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．３?ＰＣＲ驗證質粒ｐＲＮ５１０１－Ｃｍ的構建??Ｆｉｇ．?２．３?ＰＣＲ?ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐＲＮ５１０１－Ｃｗ??

華東理工大學碩士學位論文?第２３頁??３．按照測定值繪制生長曲線。??２．４結果與討論??２．４．１?／？〇／＞７？＞知?ＨＹ９６－２－Ａ／ＷＸ５１?的構建結果??（１）從戶／＾／＿＞洲；＾〇＾１丫９６－２？丁基因組上克�。癄睿担担ò耍�、／狀５－￡１〇＼￥１１（（：），從質??粒ＰＤＧ１６６１上克隆的氯霉素抗性盒（Ｂ），通過ＤＮＡ純化回收試劑盒對ＰＣＲ產(chǎn)物進行??純化回收，然后用１％瓊脂糖凝膠電泳檢測出的條帶如圖２．２所示。??Ｓ?ＳＩｍｗＡ??Ｉ??圖２．２克隆的／ｉｔｖＳ－ｕｐ?（Ａ）、氣霉素抗性盒（Ｂ）、／＂ｊｅＳ－ｄｏｗｎ?（Ｃ）片段??Ｆｉｇ．?２．２?Ｃｌｏｎｅｄ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ｌｕｘＳ－ｕｐ?（Ａ），?ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ?ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｇｅｎｅ?（Ｂ），?／ｗｘＳ－ｄｏｗｎ?（Ｃ）??（２）將純化后的?Ａ：?／ｗｘＳ－ｕｐ?（８４２ｂｐ）、Ｂ：氯霉素抗性盒（１１８８ｂｐ）、Ｃ：?／ｗｘＳ－ｄｏｗｎ??（９３５ｂｐ）與經(jīng)過?５?顯?ＨＩ?和／／／＞？ｄｍ?雙酶切的質粒?ｐＲＮ５１０１?按照?ＨｉｅｆｆＣｌｏｎｅ？?Ｍｕｌｔｉ?Ｏｎｅ??ＳｔｅｐＣｌｏｎｉｎｇＫｉｔ進行重組反應，熱激轉入ＤＨ５ａ中，ＰＣＲ驗證得到１個陽性轉化子，驗??證結果如圖２．３所示，送樣測序結果正確如圖２．４所示。??Ｍ?１?２?３４５６７８??ｓｏｏｏｉ＾ｐ?ｆ?：ｉ＇，！?＾?．，＇??＿、（）（丨ｊ）ｌ）ｐ?：?．?，??＾ＯＯＯＩ＾Ｐ??１０（Ｘ）ｂＰ?■??、＂ｉ）ｐ?鮮ｙ?種：，￣外＿－麵＿＝．．１?”??＞ｏ〇ｂｐ?＊．嚷．讓．■謂＾?＊；?１??２５０ｂｐ

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【參考文獻】：
期刊論文
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