生長停滯特異性基因6過表達在促進缺氧缺血骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞存活和心肌修復(fù)中的作用及機制研究
發(fā)布時間:2021-11-22 01:40
第一部分生長抑制特異性基因6過表達促進缺氧缺血骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞存活目的:研究生長抑制特異性基因6過表達對缺氧缺血骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞存活的影響。方法:分離純化雄性Spraque-Dawley(SD)成年大鼠(200-250g)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),流式細(xì)胞術(shù)鑒定其表面標(biāo)志。逆轉(zhuǎn)錄腺病毒系統(tǒng)將轉(zhuǎn)導(dǎo)GFP基因和Gas6基因到MSCs(MSCGas6),并將編碼綠色熒光蛋白(GFP)基因的腺病毒空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的MSCs作為對照組(MSCNull)。采用Western Blot和免疫熒光法檢測Gas6基因在MSCs中的表達情況。在缺氧條件下(95%氮和5%二氧化碳)培養(yǎng)24小時。隨后對細(xì)胞活力及凋亡情況進行評估,并定量檢測培養(yǎng)物上清液細(xì)胞損傷標(biāo)志物乳酸脫氫酶(LDH)含量。通過結(jié)扎SD雌性大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)產(chǎn)生心肌梗死。假手術(shù)組大鼠未進行冠狀動脈結(jié)扎。通過觀察結(jié)扎后左心室的蒼白變色和心電圖上的ST抬高來確認(rèn)心肌梗死造模成功。在梗塞周圍區(qū)域的5個不同部位注射5×106個MSCNull或MSC
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
英文縮略詞表及中文對照
中文摘要
ABSTRACTS
前言
第一部分 生長抑制特異性基因6過表達促進缺氧缺血骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞存活
材料與方法
結(jié)果
討論
附圖
第二部分 生長抑制特異性基因6過表達促進間充質(zhì)干細(xì)胞旁分泌減輕心肌細(xì)胞凋亡
材料與方法
結(jié)果
討論
附圖
第三部分 生長抑制特異性基因6修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善心功能異常并促進心臟修復(fù)
材料及方法
結(jié)果
討論
附圖
總論與創(chuàng)新
綜述
參考文獻
附錄
致謝
本文編號:3510676
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
英文縮略詞表及中文對照
中文摘要
ABSTRACTS
前言
第一部分 生長抑制特異性基因6過表達促進缺氧缺血骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞存活
材料與方法
結(jié)果
討論
附圖
第二部分 生長抑制特異性基因6過表達促進間充質(zhì)干細(xì)胞旁分泌減輕心肌細(xì)胞凋亡
材料與方法
結(jié)果
討論
附圖
第三部分 生長抑制特異性基因6修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善心功能異常并促進心臟修復(fù)
材料及方法
結(jié)果
討論
附圖
總論與創(chuàng)新
綜述
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