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調(diào)控叉頭盒轉(zhuǎn)錄基因F1表達對非小細胞肺癌細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、遷移和侵襲的作用

發(fā)布時間:2021-11-15 15:27
  目的通過慢病毒介導的shRNA敲低人非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)細胞株P(guān)C9中叉頭盒轉(zhuǎn)錄基因F1(forkhead box-F1,FOXF1)的表達,研究FOXF1對細胞生長及侵襲遷移等能力的影響及可能的分子機制。方法慢病毒介導的shRNA敲低FOXF1的表達,采用實時熒光定量qRTPCR實驗及Western Blot技術(shù)檢測細胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表達變化,平板克隆實驗及CCK-8法檢測細胞增殖情況,Transwell實驗檢測FOXF1基因表達對遷移及侵襲的影響,Western Blot檢測上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的表達。結(jié)果慢病毒介導的shRNA感染PC9細胞后,有效下調(diào)了PC9細胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表達水平(P <0.05),細胞的增殖能力受到抑制,細胞體外遷移及侵襲能力明顯降低;Western Blot結(jié)果顯示,抑制FOXF1表達后β-Catenin、N-cadherin、Vimentin、Snail表達下調(diào),E-cadherin、ZO-1表達上調(diào)。結(jié)論下調(diào)FOXF1表達可抑制非小細胞肺癌PC9細胞的... 

【文章來源】:實用醫(yī)學雜志. 2020,36(14)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細胞及主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 細胞轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株的構(gòu)建
        1.2.3 實時熒光定量Real-time RT-PCR
        1.2.4 CCK-8法檢測細胞增殖
        1.2.5 平板克隆形成實驗檢測細胞增殖
        1.2.6 Transwell實驗檢測細胞遷移
        1.2.7 Transwell實驗檢測細胞侵襲
        1.2.8 Western Blot法檢測細胞FOXF1蛋白的表達
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 shRNA-FOXF1對PC9細胞的沉默效果
    2.2 FOXF1沉默對細胞增殖的影響
    2.3 FOXF1沉默對PC9細胞遷移、侵襲能力的影響
    2.4 FOXF1沉默處理對細胞EMT相關(guān)基因表達的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]循環(huán)腫瘤細胞在非小細胞肺癌中的研究進展[J]. 田程,許新華.  實用醫(yī)學雜志. 2019(11)
[2]Risk factors for gastroesophageal reflux disease and analysis of genetic contributors[J]. Alexandra Argyrou,Evangelia Legaki,Christos Koutserimpas,Maria Gazouli,Ioannis Papaconstantinou,George Gkiokas,George Karamanolis.  World Journal of Clinical Cases. 2018(08)
[3]上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化與非小細胞肺癌放療敏感性相關(guān)的研究進展[J]. 張志浩,張為民.  實用醫(yī)學雜志. 2017(13)



本文編號:3497039

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