葉綠素是光合作用中不可或缺的物質(zhì),參與光合作用的光反應(yīng),主要在葉綠體內(nèi)合成,需要NADPH的參與,且受到多重調(diào)控。在光合作用中光反應(yīng)中產(chǎn)生的ATP和NADPH用于暗反應(yīng)中的碳同化。光反應(yīng)中產(chǎn)生的ATP和NADPH比值低于碳同化中的消耗的ATP和NADPH比值,因此出現(xiàn)NADPH相對(duì)過(guò)剩,對(duì)光合作用造成抑制。我們認(rèn)為,從能量利用的角度出發(fā),提高葉綠素的合成,不僅能在提高光捕獲能力的同時(shí)增加NADPH的消耗,而且能夠提高光合效率,進(jìn)而提高生物累積量。在葉綠素合成途徑中谷氨酰-tRNA還原酶（GluTR）和NADPH-原葉綠素酸脂氧化還原酶（POR）是關(guān)鍵酶,其酶促反應(yīng)都需要NADPH;GluTR受到葉綠體蛋白酶ClpC1的負(fù)調(diào)控。本研究對(duì)ClpC1基因進(jìn)行編輯和過(guò)表達(dá)PORA和PORB基因,提高了煙草的光合作用效率,具體研究的結(jié)果如下:1.克隆了煙草PORA和PORB基因,并構(gòu)建其過(guò)表達(dá)載體,同時(shí)構(gòu)建ClpC1的基因編輯載體。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化普通煙草,經(jīng)雙丙胺膦篩選、Bar基因金標(biāo)試紙檢測(cè)、PCR檢測(cè)和Southern blotting分析,分別獲得這三個(gè)載體的突變體煙草植株。2.對(duì)Cl... 

【文章來(lái)源】：長(zhǎng)春師范大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

被子植物葉綠素合成途徑Figure1chlorophyllsynthesispathwayofangiosperms（修改自2005Beale[82]）

長(zhǎng)春師范大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖2-1煙草葉片總RNA提取Fig.2-1TobaccototalRNAextractionM：2000bpDNA標(biāo)記；1，2，3：野生普通煙草RNAM:2000bpMarker;1,2,3:WT-Nt-RNA2.3.2基因的全長(zhǎng)克隆以cDNA為模版，根據(jù)設(shè)計(jì)含有酶切位點(diǎn)的克隆引物，成功克隆獲得ClpC1、PORA和PORB三個(gè)基因。將PCR產(chǎn)物于1%的瓊脂糖凝膠電泳，電泳結(jié)果見圖2-2A、圖2-2B。凝膠成像結(jié)果顯示克隆結(jié)果較好，切膠回收進(jìn)行載體構(gòu)建。圖2-2PORA、PORB和ClpC1基因擴(kuò)增Fig.2-2AmplificationofPORA、PORBandClpC1geneA：M：100bpDNA標(biāo)記；1：PORA：1200bp；2：PORB：1194bp；B：15KDNA標(biāo)記；1：ClpC1：2772bpA:M:100bpMarker;1:PORA:1200bp;2:PORB:1194bp;B:M:15KMarker;1:ClpC1:2772bp2.3.3ClpC1和POR基因序列的生物信息學(xué)分析2.3.3.1基因結(jié)構(gòu)分析

長(zhǎng)春師范大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖2-1煙草葉片總RNA提取Fig.2-1TobaccototalRNAextractionM：2000bpDNA標(biāo)記；1，2，3：野生普通煙草RNAM:2000bpMarker;1,2,3:WT-Nt-RNA2.3.2基因的全長(zhǎng)克隆以cDNA為模版，根據(jù)設(shè)計(jì)含有酶切位點(diǎn)的克隆引物，成功克隆獲得ClpC1、PORA和PORB三個(gè)基因。將PCR產(chǎn)物于1%的瓊脂糖凝膠電泳，電泳結(jié)果見圖2-2A、圖2-2B。凝膠成像結(jié)果顯示克隆結(jié)果較好，切膠回收進(jìn)行載體構(gòu)建。圖2-2PORA、PORB和ClpC1基因擴(kuò)增Fig.2-2AmplificationofPORA、PORBandClpC1geneA：M：100bpDNA標(biāo)記；1：PORA：1200bp；2：PORB：1194bp；B：15KDNA標(biāo)記；1：ClpC1：2772bpA:M:100bpMarker;1:PORA:1200bp;2:PORB:1194bp;B:M:15KMarker;1:ClpC1:2772bp2.3.3ClpC1和POR基因序列的生物信息學(xué)分析2.3.3.1基因結(jié)構(gòu)分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]油蒿（Artemisia ordosica）光化學(xué)量子效率和非光化學(xué)淬滅的動(dòng)態(tài)及其影響因子[J]. 吳雅娟,查天山,賈昕,秦樹高,李媛,王奔.  生態(tài)學(xué)雜志. 2015(02)
[2]氣孔導(dǎo)度對(duì)CO2濃度變化的模擬及其生理機(jī)制[J]. 王建林,溫學(xué)發(fā).  生態(tài)學(xué)報(bào). 2010(17)
[3]大豆高光效育種研究[J]. 滿為群,杜維廣,郝迺斌.  大豆科學(xué). 2009(03)
[4]外部因素對(duì)小麥旗葉光合速率和Rubisco活性的影響[J]. 韓鷹,陳剛,李克武,熊飛,張國(guó)良,王忠.  江蘇農(nóng)業(yè)研究. 1999(03)

博士論文
[1]溫度脅迫下番茄葉綠體谷胱甘肽還原酶基因的克隆、表達(dá)和功能分析[D]. 束德峰.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]玉米NDH復(fù)合體核基因進(jìn)化分析和NdhL亞基超表達(dá)水稻的耐鹽性光合機(jī)制研究[D]. 李晨柳.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[2]緣管滸苔NPQ光保護(hù)機(jī)制及其四個(gè)基因的功能研究[D]. 管正.上海海洋大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3494218