發(fā)布時(shí)間：2021-11-13 13:38

　　第一部分在口腔鱗癌細(xì)胞系中基因Y高表達(dá)及敲降穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系的建立及其對(duì)生物學(xué)表型的影響目的:通過在口腔鱗癌細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)基因Y的表達(dá)改變,研究基因Y對(duì)該細(xì)胞增殖、遷移等生物學(xué)行為的影響,從而探索基因Y在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用,為探索其分子機(jī)制和尋找腫瘤標(biāo)志物提供線索和方向。方法:1.高表達(dá)和敲降基因Y的慢病毒顆粒轉(zhuǎn)染口腔鱗癌細(xì)胞（scc-25細(xì)胞）,經(jīng)嘌呤霉素（puro）篩選后建立該細(xì)胞的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系;采用qPCR實(shí)驗(yàn)及Western Blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系中基因Y在mRNA及蛋白水平的表達(dá)變化情況。2.采用實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記細(xì)胞功能分析儀進(jìn)行生長(zhǎng)曲線的測(cè)定,檢測(cè)基因Y對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響;采用transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)基因Y對(duì)細(xì)胞遷移及侵襲能力的影響;采用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)基因Y對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)基因Y對(duì)細(xì)胞的細(xì)胞周期分布情況的影響。3.采用裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn),檢測(cè)基因Y對(duì)裸鼠皮下瘤體生長(zhǎng)情況的影響。結(jié)果:1.經(jīng)qPCR實(shí)驗(yàn)及Western Blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,基因Y在該細(xì)胞中的mRNA及蛋白水平均有明顯的升高與降低,說明口腔鱗癌的基因Y高表達(dá)及敲降穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系建立... 

【文章來(lái)源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

一日

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3493120