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CNOT7基因敲減通過(guò)JAK/STAT通路減少GM-CSF分泌對(duì)肝癌腫瘤免疫微環(huán)境影響的相關(guān)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-06 12:29
  目的:研究人CCR4-NOT轉(zhuǎn)錄復(fù)合體亞基7(human CCR4-NOT transcription complex subunit 7,CNOT7)敲減通過(guò)JAK/STAT通路減少腫瘤來(lái)源的GM-CSF分泌,進(jìn)而干預(yù)髓源性抑制細(xì)胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在局部腫瘤免疫微環(huán)境的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:1.ELISA法檢測(cè)肝癌、肝炎、健康志愿者外周血GM-CSF分泌水平及TTCS和NTCS中GM-CSF分泌水平,并進(jìn)行比較;2.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腫瘤組織、瘤緣、非腫瘤正常肝組織中MDSCs數(shù)量;3.篩選合適肝癌細(xì)胞系;使用RNA干擾(RNAi)技術(shù),將CNOT7重組質(zhì)粒及相應(yīng)對(duì)照空載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞;4.Western blot方法檢測(cè)敲減組、空質(zhì)粒組和對(duì)照組CNOT7及信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中STAT1、STAT3、GM-CSF的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.肝癌組、肝炎組、對(duì)照組外周血GM-CSF水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。2.與腫瘤組(9.66±2.73 pg/ml)和正常肝組織組(11.61±2.89pg/ml)相比,瘤緣組(... 

【文章來(lái)源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

CNOT7基因敲減通過(guò)JAK/STAT通路減少GM-CSF分泌對(duì)肝癌腫瘤免疫微環(huán)境影響的相關(guān)研究


外周血GM-CSF水平

腫瘤,組織培養(yǎng),外周血,腫瘤組織


圖 2-1 外周血 GM-CSF 水平2.1.2 腫瘤局部 GM-CSF 分泌水平檢測(cè)腫瘤組織培養(yǎng)上清液(TTCS)和非腫瘤組織培養(yǎng)上清液(NTCS),ELISA TTCS 和 NTCS 中 GM-CSF 分泌(圖 2-2):可以觀察到瘤緣組(GM-CSF=32.8.90pg/ml),與腫瘤組(GM-CSF=9.66±2.73 pg/ml)相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;瘤緣正常肝組織組(GM-CSF=11.61±2.89pg/ml)相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

比率,細(xì)胞,肝癌組織,流式細(xì)胞術(shù)


山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2.2 檢測(cè)肝癌免疫微環(huán)境 DMSCs 數(shù)量2.2.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果取確診為肝細(xì)胞癌患者組織病理標(biāo)本(n=10),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肝癌組織、癌腫邊緣組織、正常肝組織勻漿單細(xì)胞懸液,檢測(cè)各組 DMSCs(CD33+CD11b+)細(xì)胞比率,與肝癌組織組(4.16±2.22%)、正常肝組織組(6.22±2.29%)相比,瘤緣組(11.90±3.96%)中 CD33+CD11b+細(xì)胞比率明顯增多,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。(圖 2-3)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CNOT7基因敲減通過(guò)減少HepG2細(xì)胞TGF-β1分泌影響免疫微環(huán)境[J]. 郭舜,趙海潮,任曉靜,任崇仁,賀杰峰,趙浩亮.  中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(03)



本文編號(hào):3479835

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