發(fā)布時間：2021-11-06 09:45

　　甘蔗是最重要的糖料作物。在世界食糖總產(chǎn)量中,75%來自甘蔗,而在我國則占90%以上。甘蔗生產(chǎn)對中國的食糖安全至關(guān)重要。甘蔗通過光合作用產(chǎn)生的蔗糖,從源組織運(yùn)輸?shù)綆旖M織的跨膜運(yùn)輸需要蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（SUT）的介導(dǎo)。SUT在蔗糖的貯藏、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝等生理過程中發(fā)揮著重要作用。本試驗以6個T1代轉(zhuǎn)基因甘蔗品系（T1、T2、T3、T6、T9、T11）和對照（WT）為材料,采用溫室大棚種植,旨在探究甘蔗在苗期、分蘗期、伸長期、工藝成熟期的農(nóng)藝性狀、蔗糖代謝相關(guān)酶活性以及甘蔗在工藝成熟期的節(jié)間糖分和SoSUT5表達(dá)量,為探究SoSUT5的功能提供研究參考依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）利用多重PCR和除草劑抗性篩選驗證了轉(zhuǎn)基因材料。通過PCR擴(kuò)增標(biāo)記基因bar植物表達(dá)載體與外源基因SoSUT5構(gòu)成的重組片段,并對bar基因測序,結(jié)果表明,6個甘蔗品系均為轉(zhuǎn)基因甘蔗。經(jīng)過除草劑抗性篩選,6個甘蔗品系均具有一定的除草劑抗性,進(jìn)一步從表現(xiàn)型上證明了它們是轉(zhuǎn)基因甘蔗。（2）對甘蔗的農(nóng)藝性狀調(diào)查的結(jié)果表明,除品系T6外,轉(zhuǎn)基因甘蔗的株高增高,莖徑增粗,二者都隨著生長而不斷增加,品系T1、T2的株高與WT的差異達(dá)顯... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１甘蔗總ＤＮＡ電泳檢測圖??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ＤＮＡ??

２．４．１甘薦總ＤＮＡ提取??按照ＤＮＡ提取試劑盒說明書提取甘蔗總ＤＮＡ，經(jīng)１％的瓊脂糖凝膠電泳檢??測（圖２－１），結(jié)果顯示電泳條帶清晰，說明提取的ＤＮＡ無雜帶和降解。??ｌｉｉｉｉｌＭ??圖２－１甘蔗總ＤＮＡ電泳檢測圖??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ＤＮＡ??１＊６：轉(zhuǎn)細(xì)ｉｉｉｔｒ蔗品系（Ｔｌ、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９、Ｔｉｌ）：?７：野生?１廿蔗（ＷＴ）??１－６：?ＳｏＳＵＴ５?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ｌｉｎｅｓ?（Ｔｌ，?Ｔ２．?Ｔ３，?Ｔ６，?Ｔ９，?Ｔ１１）；?７：?ｗｉｄｅ?ｔｙｐｅ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?（ＷＴ）??２．４．２轉(zhuǎn)化甘蔗的ＰＣＲ檢測??由ｈｒ引物擴(kuò)增出的ＰＣＲ產(chǎn)物，經(jīng)０．８％的瓊脂糖凝膠電泳檢測，結(jié)果（圖??２－２）顯示，６個品系擴(kuò)增出的條帶均與正對照的條帶一致，且負(fù)對照的條帶彌散，??水的條帶不與正對照一致，可能是引物二聚體。將６個品系擴(kuò)增出的產(chǎn)物經(jīng)膠回??收純化后送測序，并將得到的測序結(jié)果在ＮＣＢＩ上進(jìn)行序列比對，結(jié)果顯示擴(kuò)增??片段的序列與目的基因序列一致

廣西大學(xué)領(lǐng)士學(xué)位論文?轉(zhuǎn)基因甘廉Ｔ！代的生理生化特性分析??由ｐＵＢＴＣ－ＳｏＳＵＴ５引物擴(kuò)增出的ＰＣＲ產(chǎn)物，經(jīng)０．８％的瓊脂糖凝膠電泳檢??測，結(jié)果（圖２－３）顯示，６個品系擴(kuò)增出的條帶均與正對照的條帶一致，且負(fù)對??照的條帶與正對照條帶不一致。由ｐＵＢＴＣ?－?ＳｏＳＵＴ５引物擴(kuò)增出的ＰＣＲ產(chǎn)物包??含了質(zhì)粒ｐＵＢＴＣ片段和外源基因乃片段，證明６個品系均為轉(zhuǎn)基因甘蔗。??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3479610