本文關(guān)鍵詞：大鯢性腺發(fā)育及Sox14基因表達(dá)特性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：大鯢(Megalobatrachusdavidianus)是我國(guó)特有珍稀兩棲動(dòng)物,具有很高的藥用價(jià)值、食用價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科學(xué)研究?jī)r(jià)值,然而野生大鯢資源量因自然環(huán)境的破壞和大量非法捕殺急劇下降,已成為國(guó)家二類保護(hù)水生野生動(dòng)物。21世紀(jì)初,隨著大鯢資源的進(jìn)一步衰減和市場(chǎng)售價(jià)的攀升,大鯢人工養(yǎng)殖逐漸興起,目前已成為部分地區(qū)的特色產(chǎn)業(yè)。但受制于對(duì)大鯢繁殖基礎(chǔ)研究不足,加之大鯢性腺發(fā)育和繁殖的獨(dú)特性,使得大鯢人工繁殖技術(shù)一直沒(méi)有大的突破,其中親鯢性腺發(fā)育慢、雄鯢成熟度差導(dǎo)致的繁殖率低,一直是大鯢繁育技術(shù)的瓶頸。為深入了解大鯢性腺發(fā)育規(guī)律和繁殖特性。本實(shí)驗(yàn)對(duì)大鯢腦垂體和精巢的組織特點(diǎn),親鯢的激素水平和代謝強(qiáng)度,以及Sox14基因的結(jié)構(gòu)和表達(dá)特性進(jìn)行了初步研究,獲得如下結(jié)果:1.通過(guò)組織切片觀察,結(jié)果顯示:與魚(yú)類及其他兩棲動(dòng)物相似,大鯢腦垂體包括神經(jīng)垂體和腺垂體兩部分。腺垂體分為結(jié)節(jié)部、中間部和遠(yuǎn)側(cè)部,大鯢腺垂體中間部較發(fā)達(dá),遠(yuǎn)側(cè)部?jī)?nèi)按細(xì)胞嗜色性可分為嗜堿區(qū)、嗜酸區(qū)和混合區(qū)。大鯢精細(xì)管管腔狹長(zhǎng),精細(xì)管互相交錯(cuò)形成精巢網(wǎng),這可能是大鯢排精量少、排精難的原因。大鯢同一個(gè)體性腺中精細(xì)胞發(fā)育不同步,不同個(gè)體之間性腺發(fā)育也不同步,造成大鯢人工繁殖過(guò)程中催產(chǎn)率、受精率低等問(wèn)題。2.激素水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn),大鯢性腺發(fā)育表現(xiàn)出三個(gè)特點(diǎn):(1)成熟雌雄大鯢性腺發(fā)育規(guī)律基本一致,表現(xiàn)為春季隨溫度上升血清激素水平升高,且均在6月達(dá)到峰值,其后開(kāi)始下降。表明人工養(yǎng)殖條件下雌雄親鯢性腺發(fā)育較為同步,但繁殖期較短;(2)成熟雌雄大鯢性腺發(fā)育對(duì)溫度的敏感性不同,其中睪酮隨溫度變化表現(xiàn)出劇烈變化,而雌二醇變化相對(duì)平緩。表明雄性性腺發(fā)育對(duì)溫度更加敏感;(3)成熟雌雄大鯢生殖激素水平差異較大,3.血清生化指標(biāo)檢測(cè)表明,雌性大鯢的總膽固醇、甘油三酯、高密度膽固醇、低密度膽固醇含量總體水平顯著高于雄性(P0.05),這些生化指標(biāo)的雌雄差異對(duì)大鯢的雌雄鑒定和性腺發(fā)育時(shí)期鑒定具有指導(dǎo)意義。雌雄大鯢血清尿素含量的峰值不同步出現(xiàn),可能是雌雄大鯢性腺發(fā)育不同步的原因之一。4.大鯢激素敏感性實(shí)驗(yàn)表明,成熟雌雄大鯢均對(duì)HCG敏感,注射后24h激素水平達(dá)到最高,其后開(kāi)始下降,48小時(shí)后下降至較低水平;但雌雄成熟大鯢對(duì)LH-A2均不敏感,注射后48小時(shí)無(wú)顯著變化。表明,HCG更適合用于大鯢人工催產(chǎn)。5.大鯢Sox14基因生物信息學(xué)和表達(dá)特性研究表明,大鯢SOX14基因cDNA全長(zhǎng)1470bp,其中ORF720 bp,編碼239個(gè)氨基酸,編碼蛋白分子量為26.75kd,等電點(diǎn)為9.68,無(wú)信號(hào)肽和跨膜螺旋區(qū),與熱帶爪蟾(X.topiciles)同源性為91%,與魚(yú)類、人類等遠(yuǎn)源物種相似度都在80~90%之間。主要在性成熟大鯢性腺組織高表達(dá),并隨年齡的增加表達(dá)量增多。以上研究結(jié)果表明:1.大鯢腦垂體精巢內(nèi)生殖細(xì)胞發(fā)育不同步可能是造成大鯢繁殖率低的主要原因;2.人工養(yǎng)殖大鯢性腺發(fā)育基本同步,但雄性大鯢對(duì)溫度變化更為敏感,二者均對(duì)HCG敏感,HCG可用于大鯢人工催產(chǎn);3.大鯢Sox14基因主要在性成熟大鯢的性腺中表達(dá),和大鯢性腺發(fā)育相關(guān),可作為大鯢性腺發(fā)育標(biāo)志基因。
【關(guān)鍵詞】：大鯢 性腺發(fā)育 生殖激素 代謝強(qiáng)度 Sox14
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S917.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-20
• 1.1 大鯢的研究進(jìn)展12-19
• 1.1.1 大鯢腦垂體和精巢形態(tài)結(jié)構(gòu)的研究進(jìn)展12-13
• 1.1.2 性激素對(duì)大鯢性腺發(fā)育影響的研究13-16
• 1.1.3 雌雄大鯢生理代謝強(qiáng)度差異及其變化規(guī)律的研究進(jìn)展16
• 1.1.4 雌雄大鯢體征差異的研究進(jìn)展16-17
• 1.1.5 大鯢Sox14基因的研究進(jìn)展17-19
• 1.2 研究的目的及意義19-20
• 第二章 大鯢垂體和精巢形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察20-26
• 2.1 引言20
• 2.2 材料和方法20-21
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備20
• 2.2.3 主要試劑20
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-24
• 2.3.1 大鯢腦垂體形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察21-22
• 2.3.2 大鯢精巢的形態(tài)和結(jié)構(gòu)觀察22-24
• 2.4 討論24-25
• 2.4.1 大鯢腦垂體的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察24
• 2.4.2 大鯢精巢的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察24-25
• 2.5 小結(jié)25-26
• 第三章 大鯢生殖激素變化規(guī)律及血清生化指標(biāo)測(cè)定26-35
• 3.1 引言26
• 3.2 材料與方法26-28
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備和耗材26-27
• 3.2.3 試驗(yàn)方法27-28
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-32
• 3.3.1 大鯢生殖激素季節(jié)變化規(guī)律28-29
• 3.3.2 雌雄大鯢血清生化指標(biāo)差異和變化規(guī)律29-31
• 3.3.3 大鯢對(duì)兩種催情劑的敏感性31
• 3.3.4 雌雄大鯢體型特征差異31-32
• 3.4 討論32-34
• 3.4.1 大鯢生殖激素變化規(guī)律32-33
• 3.4.2 雌雄大鯢血清生化指標(biāo)差異及變化規(guī)律33-34
• 3.4.3 大鯢對(duì)兩種催情劑的敏感性實(shí)驗(yàn)34
• 3.5 小結(jié)34-35
• 第四章 大鯢Sox14基因的表達(dá)研究35-46
• 4.1 引言35
• 4.2 材料和方法35-37
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法36-37
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-44
• 4.3.1 大鯢Sox14基因的生物信息學(xué)分析37-43
• 4.3.2 大鯢Sox14基因的組織表達(dá)43
• 4.3.3 大鯢Sox14在不同發(fā)育階段的表達(dá)43-44
• 4.4 討論44-45
• 4.4.1 大鯢Sox14基因的生物信息學(xué)分析及進(jìn)化分析44
• 4.4.2 大鯢Sox14基因的組織表達(dá)44-45
• 4.5 小結(jié)45-46
• 第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)46-48
• 結(jié)論46-47
• 創(chuàng)新點(diǎn)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 附錄52-56
• 致謝56-57
• 作者簡(jiǎn)介57

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本文編號(hào)：346192