發(fā)布時間：2021-10-21 09:39

　　目的:檢測非小細胞肺癌組織中MAGE-D4蛋白的表達和血清中MAGE-D4抗體,并進一步分析它們與患者臨床病理指標之間的關系。構建MAGE-D4真核表達質粒,篩選基因穩(wěn)定沉默的肺癌細胞株,為后續(xù)研究MAGE-D4的生物學功能提供條件。方法:1.采用Oncomine癌基因芯片數(shù)據(jù)庫中兩個獨立的肺癌數(shù)據(jù)集Hou Lung（肺癌樣本91例,正常肺組織65例）和Okayama Lung（肺癌樣本226例,正常肺組織20例）分析MAGE-D4 mRNA的表達。2.通過免疫組織化學染色法檢測81例非小細胞肺癌組織和38例癌旁組織中MAGE-D4蛋白的表達及細胞定位,并分析蛋白表達的陽性率與NSCLC患者臨床病理參數(shù)之間的關系。3.采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測74例非小細胞肺癌患者血清中MAGE-D4抗體的陽性率及效價,并分析其與NSCLC患者臨床病理參數(shù)的關系。4.通過RT-PCR檢測3株肺癌細胞A549、H460、PC9中MAGE-D4的表達情況。使用MAGE-D4 shRNA重組慢病毒感染高表達MAGE-D4的肺癌細胞,經(jīng)過嘌呤霉素篩選,獲得穩(wěn)定沉默MAGE-D4基因的細胞株;通過RT-qPCR和... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

肺癌組織芯片中MAGE-D4mRNA的表達Fig.1-1ExpressionofMAGE-D4mRNAinlungcancertissuemicroarray

21圖 1-2 免疫組織化學染色檢測 MAGE-D4 蛋白（200×）Fig.1-2 MAGE-D4 protein expression tested by IHC（200×）a: negative control (paracancerous tissue)；b: expression of pre-immune serum in lung adenocarcinoma ；c: co-expression in the nucleus and cytoplasm；d: weak expression in lung adenocarcinoma；e: moderateexpression in lung adenocarcinoma；f: strong expression in adenocarcinoma; g: weak expression in lungsquamous cell carcinoma; h: moderate expression in lung squamous cell carcinoma；i: strong expression inlung squamous cell carcinoma

S 17.0 軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析，樣本均數(shù)的使用 χ2檢驗或 Fisher 確切概率法，檢驗水準學意義。的濃度測定 蛋白定量試劑盒測定包被蛋白濃度，標03，決定系數(shù) R2=0.9969（圖 2-1）。決定系數(shù)高的準確度，可用于計算包被蛋白的濃度。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]膠質瘤相關抗原MAGE-D4基因重組、表達特性分析及抗體血清學檢測[D]. 賀菽嘉.廣西醫(yī)科大學 2010



本文編號：3448725