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擬南芥MAC1基因的克隆與功能分析

發(fā)布時間:2021-10-13 11:45
  隱花色素(CRYPTOCHROME,簡稱CRY)是一類在植物和動物體內(nèi)普遍存在的蛋白,具有感受藍光和調(diào)節(jié)重力感應等功能。在植物中,CRYs作為藍光受體,能夠影響藍光誘導的花發(fā)育、生物鐘、晝夜節(jié)律調(diào)控和幼苗形態(tài)建成等過程。在模式植物擬南芥中,CRY1主要介導藍光抑制下胚軸的伸長,CRY2則主要介導藍光促進光周期控制的開花,為了進一步研究隱花色素CYR2的調(diào)控功能,通過篩選帶有CRY2-LUC轉(zhuǎn)基因的EMS誘變突變體庫,分離鑒定出一個SUS2/PRP8基因的等位基因突變體,我們將突變體命名為mac1(more abundant of cry2 1),并對MAC1基因的功能進行初步的探索。主要的實驗結(jié)果如下:1、篩選EMS誘變庫并獲得一個具有早花表型,并且CRY2表達量上調(diào)的突變體植株,將其命名為mac1。通過多態(tài)性分子標記對mac1突變體進行圖位克隆,確定突變位點位于MAC1基因第六個外顯子發(fā)生了堿基突變,一個鳥嘌呤核苷酸(G)突變成了腺嘌呤核苷酸(A),導致甘氨基酸變成了精氨基酸。2、構(gòu)建MAC1基因的CRISPR/Cas9敲除載體并轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得mac-cr突變體材料,對獲得的突變體... 

【文章來源】:山西大學山西省

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 隱花色素
        1.1.1 隱花色素的簡介
        1.1.2 隱花色素的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 隱花色素的功能
        1.1.4 隱花色素的信號轉(zhuǎn)導途徑
    1.2 PRP8 的簡介
    1.3 CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù)
    1.4 研究內(nèi)容和意義
第二章 實驗材料與方法
    2.1 材料、試劑和儀器
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗器材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 突變體mac1/CRY2-LUC的篩選
        2.2.2 突變體mac1基因定位
        2.2.3 擬南芥mac1基因克隆及遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.4 擬南芥mac1中CRY2 基因的表達分析
        2.2.5 擬南芥mac1開花時間表型分析
        2.2.6 擬南芥mac1突變體下胚軸長度分析
        2.2.7 實驗所用引物列表
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 mac1突變體的獲得
    3.2 mac1是SUS2/PRP8 基因的等位突變體
    3.3 MAC1 基因的克隆與功能分析
    3.4 mac1基因突變導致內(nèi)源CRY2 蛋白降解變慢
    3.5 mac1突變體表現(xiàn)早花表型
    3.6 mac1突變體表現(xiàn)下胚軸變短表型
第四章 討論與展望
第五章 結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式


【參考文獻】:
期刊論文
[1]擬南芥隱花色素CRY2調(diào)控因子PRP8基因的功能分析[J]. 郭亞蓉,王艷艷,劉軍,裴雁曦.  生物技術(shù)進展. 2019(02)
[2]農(nóng)作物EMS誘變研究進展[J]. 黃冬福,付文婷,韓世玉,何建文.  北方園藝. 2015(24)



本文編號:3434598

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