DNA甲基化是表觀遺傳修飾重要方式之一,參與調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育及進(jìn)化等一系列生命過程。DNA甲基化的建立和維持依靠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的參與。本論文以烏拉爾甘草為材料,通過PCR技術(shù)分離到甘草中疑似甲基轉(zhuǎn)移酶基因部分序列,通過相關(guān)生物信息學(xué)分析,得到初步確認(rèn)。構(gòu)建了其與苜蓿、擬南芥等20個物種相關(guān)基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹;采用實時熒光定量技術(shù)（RT-qPCR）研究了甘草幼苗中三類甲基轉(zhuǎn)移酶基因經(jīng)過高壓靜電場處理的表達(dá)情況。主要結(jié)果如下:1、采用簡并引物PCR擴(kuò)增的方法,從甘草基因組中分離出了MET1類、DRM類和CMT類甲基轉(zhuǎn)移酶基因片段各一條。MET1類甲基轉(zhuǎn)移酶目的片段長度為951bp,與豌豆MET1基因核酸序列相似性為92.63%;DRM類甲基轉(zhuǎn)移酶目的片段長度為357bp,與苜蓿DRM2基因核酸序列相似性為92.37%;CMT類甲基轉(zhuǎn)移酶目的片段長度為692bp,與苜蓿CMT1基因核酸序列相似性為83.97%。2、采用系統(tǒng)進(jìn)化分析法構(gòu)建了甘草MET1類、DRM類和CMT類甲基轉(zhuǎn)移酶基因和其它20余物種的進(jìn)化樹,甘草的MET1類甲基轉(zhuǎn)移酶和鷹嘴豆距離很近,與DRM類甲基轉(zhuǎn)移酶距離最近的是苜蓿,... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

甘草基因組DNA電泳圖

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文13圖2-3以甘草DNA為模板的PCR電泳圖M:2000bpDNAMaker;1：CMT類基因片段擴(kuò)增結(jié)果；2：DRM類基因片段擴(kuò)增結(jié)果；3，4：MET1類基因片段擴(kuò)增結(jié)果Fig.2-3TheelectrophoresisofPCRusinglicoricegenomicDNAasatemplateM:2000bpDNAMaker;1:AmplifiedresultofCMT-like;2:AmplifiedresultofDRM-like;3,4:AmplifiedresultofMET1-like2.3.4基因特異片段序列分析2.3.4.1MET1基因特異片段序列分析測序結(jié)果表明，引物對M1/M2擴(kuò)增片段長度951bp，與預(yù)期大小一致。進(jìn)入NCBI進(jìn)行BLAST，結(jié)果顯示，引物對M1/M2擴(kuò)增出的951bp片段Gu-M1與豌豆MET1基因(AF034419)的核酸序列相似性為92.63%，E-value:3e-177;氨基酸序列相似性為96.08%，E-value:5e-30�？纱_認(rèn)Gu-M1為甘草MET1基因特異性片段。

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文14圖2-4MET1類基因片段核酸序列與豌豆序列在BLAST中比對Query:所測甘草序列;Subject:豌豆序列AlignmentScores>=20080-200Figure2-4MET1genefragmentnucleicacidsequenceandpeasequencealignmentinBLASTQuery:measuredlicoricesequence;Subject:peasequenceAlignmentScores>=20080-200

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3427193