目的:本研究目的為研究人卵丘顆粒細胞（cumulus cells,CCs）中ADAMTS1與HSPG2的表達情況是否與卵母細胞質量有關,能否作為預測體外受精-胚胎移植臨床結局的潛在生物標志物。方法:本研究分為三部分內容:第一部分為野生型C57BL/6小鼠上進行的動物實驗,我們收集了注射人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,h CG）后不同時間點（0h,4h,8h,12h及16h）的CCs,進行RNA提取、逆轉錄和RT-PCR,檢測了ADAMTS1與HSPG2在整個排卵過程中的表達模式,并利用si RNA技術干擾ADAMTS1后檢測HSPG2的表達變化,從而研究兩者可能的關系。第二部分為基于人類標本的研究,我們收集了共148名（45名多囊卵巢綜合癥患者及103名輸卵管性因素或男方因素）進行IVF/ICSI患者的CCs進行目的基因m RNA表達情況的檢測,并統(tǒng)計了每一位病人的獲卵數(shù)、成熟卵數(shù)、受精率、可移植胚胎率、優(yōu)胚率、有無著床等臨床數(shù)據(jù),最后統(tǒng)計分析得出多囊卵巢綜合征組及正常排卵組中ADAMTS1與HSPG2的表達情況、臨床結局的差異。第三部分對... 

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

卵巢內卵泡發(fā)育過程

浙江大學碩士學位論文正文第一章緒論3卵母細胞成熟后以MII期卵母細胞的形式和周邊的卵丘顆粒細胞一同被排出，受精后完成第二次減數(shù)分裂。因而，通常意義上，生理狀態(tài)下正常排出了第一極體的MII期卵母細胞是成熟卵，也叫MII期卵，具有受精能力。1.1.3卵丘擴展和細胞外基質重塑哺乳動物排卵前，卵母細胞成熟伴隨著卵丘擴展，在LH與卵泡刺激素（folliclestimulatinghormone，F(xiàn)SH）的作用下卵丘顆粒細胞可以分泌并集聚多糖基質，其主要成分是透明質酸。如圖1.2所示，在積聚的透明質酸的作用下，卵丘顆粒細胞分離擴散。當卵子與精子相遇，精子釋放的透明質酸酶會使卵丘顆粒細胞脫落，進行后續(xù)的受精過程。細胞外基質（extracellularmatrix，ECM）重塑是卵泡破裂排卵過程中其中關鍵作用的一步，其特征是ECM成分的局部降解，這些成分包括versican、層粘連蛋白、IV型膠原、perlecan和纖維蛋白等[3,9-13]。細胞外基質重塑貫穿于整個排卵過程。成功的排卵過程需要精確的ECM重塑來確保卵泡破裂[12,14-17]，而卵母細胞與卵丘顆粒細胞、壁層顆粒細胞及其他細胞之間的密切聯(lián)系及相互作用是這一過程的基矗圖1.2卵丘擴展前后COC圖

浙江大學碩士學位論文正文第一章緒論41.1.4卵母細胞與卵丘顆粒細胞的關系卵丘顆粒細胞作為緊緊圍繞在卵母細胞周圍的細胞，它可以通過縫隙連接及旁分泌途徑對卵母細胞產生重大影響，卵丘顆粒細胞在竇前卵泡階段促進卵母細胞生長、竇卵泡階段維持卵母細胞減數(shù)分裂阻滯狀態(tài)、卵母細胞成熟階段影響卵母細胞減數(shù)分裂恢復，促進卵母細胞mRNA翻譯，以及為卵母細胞提供各階段必須的代謝小分子等方面發(fā)揮作用[18-20]。另一方面，卵母細胞也通過旁分泌因子（oocytesecretefactors，OSFs）對卵丘顆粒細胞的增殖、凋亡與抗凋亡、拮抗黃素化作用、卵丘擴展等方面進行調節(jié)[16,18,21,22]。在整個卵泡發(fā)育過程中，卵母細胞與卵丘顆粒細胞互相調節(jié)。以排卵過程為例，如圖1.3所示[23]，在LH、FSH等多個分子及信號通路影響下，卵丘顆粒細胞及壁層顆粒細胞分泌相應的金屬肽酶含血小板反應蛋白1(adisintegrinandmetalloproteasewiththrombospondintype1motif1，ADAMTS1)、versican等成分，卵母細胞也分泌包括生長分化因子9（growthdifferentiationfactor9，GDF9）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白15（bonemorphogeneticprotein15，BMP15）在內的相關因子并作用于卵丘顆粒細胞，最終在各種因子的影響下卵母細胞被排出卵泡，與之類似，卵母細胞的各階段情況都在卵丘顆粒細胞上留下了如信號通路改變、基因表達情況變化等印記[2,19,24-28]。圖1.3排卵的信號通路及介質

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本文編號：3410246