為揭示結(jié)縷草LEA蛋白在植物逆境脅迫應(yīng)答過程中的作用與功能,利用RT-PCR方法從日本結(jié)縷草Meyer中克隆得到一個(gè)lea基因,命名為Zjlea3,對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析。蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析結(jié)果表明:該基因編碼產(chǎn)物包含177個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子質(zhì)量為18.3 ku,理論等電點(diǎn)（pI）為5.63,為親水性蛋白,含有9個(gè)特征性的11氨基酸基序,屬于LEA蛋白中的第3組成員。聚類分析結(jié)果表明:Zjlea3蛋白與高粱、石茅等耐高溫物種的同源蛋白親緣關(guān)系最近。熒光定量PCR分析顯示:在低溫、干旱和高鹽脅迫下,Zjlea3基因表達(dá)量均有上調(diào),表達(dá)量峰值分別出現(xiàn)在72,24,72 h,其中受低溫誘導(dǎo)上調(diào)幅度最大。轉(zhuǎn)基因酵母抗逆性分析顯示:轉(zhuǎn)化Zjlea3基因的酵母細(xì)胞對(duì)冷凍、高鹽和高滲脅迫的耐受能力顯著提升。由此推測(cè)Zjlea3蛋白參與結(jié)縷草抵御低溫、干旱和高鹽等非生物脅迫的調(diào)控。 

【文章來源】：華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2020,35(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

酵母表達(dá)載體

Zjlea3基因能夠編碼177個(gè)氨基酸,且其中含有9個(gè)拷貝的由11氨基酸組成的基元序列(圖2)。Zjlea3蛋白的預(yù)測(cè)分子質(zhì)量為18.3 ku,理論等電點(diǎn)(pI)為5.63,且其主要氨基酸組成為丙氨酸(Ala)18.1%、蘇氨酸(Thr)13.6%、賴氨酸(Lys)12.4%、谷氨酰胺(Gln)9.0%、甘氨酸(Gly)9.0%、谷氨酸(Glu)8.5%、絲氨酸(Ser)7.3%、天冬氨酸(Asp)7.3%,無半胱氨酸和色氨酸,氨基酸平均親水性指數(shù)(GRAVY)為-1.134,這些結(jié)果表明,Zjlea3基因能夠編碼一個(gè)親水性強(qiáng)的小分子蛋白質(zhì)。蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示,該蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要是α-螺旋(Hh)、無規(guī)則卷曲(Cc),所占比例分別為78.53%,16.38%,另外2種結(jié)構(gòu)為延伸鏈(Ee)2.82%、β-折疊(Tt)2.26%(圖3)。蛋白跨膜區(qū)分析結(jié)果表明,Zjlea3蛋白的第1-177位氨基酸均位于細(xì)胞膜表面,暗示該蛋白不含有跨膜區(qū),屬于非跨膜蛋白(圖4)。圖3 Zjlea3蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

Zjlea3蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3390926