本研究以羅伯茨綠僵菌為研究對(duì)象,針對(duì)5′-3′核糖核酸外切酶基因（Mr Xrn1,MAA₀9154,5′-3′exoribonuclease1）,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的同源重組方法進(jìn)行基因敲除。對(duì)獲得的Mr Xrn1基因敲除株（?MrXrn1）與野生型進(jìn)行表型分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),與野生型相比,?Mr Xrn1的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)無(wú)明顯變化,而產(chǎn)孢能力顯著下降,其中產(chǎn)孢量降低了75.75%;以大蠟螟為試蟲(chóng)的體壁侵染毒力分析顯示?Mr Xrn1的毒力顯著減少,也即半致死時(shí)間（LT50:9.16 d）顯著長(zhǎng)于野生型的（5.96 d）,但注射接種情況下不同菌株的毒力無(wú)差異;進(jìn)一步的研究表明?MrXrn1的附著孢形成率降低了43.58%。這些結(jié)果說(shuō)明Mr Xrn1基因?qū)G僵菌的產(chǎn)孢及毒力起著重要的調(diào)控作用。本研究為進(jìn)一步有效提高真菌殺蟲(chóng)劑的生防效果提供了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2020,36(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

Mr Xrn1的序列特征分析

為了進(jìn)一步探析Mr Xrn1基因是否參與調(diào)控羅伯茨綠僵菌附著胞的形成，在蟬翅誘導(dǎo)的水瓊脂平板上觀察不同菌株（WT、?Mr Xrn1和Comp）的附著胞形成情況。結(jié)果顯示：WT、?Mr Xrn1和Comp附著孢形成率分別為（80.01±4.56）%、（36.43±0.49）%和（75.95±8.47）%；與WT比較，?Mr Xrn1的附著孢形成率下降了43.58%(P<0.05，圖4E,F）。結(jié)果表明Mr Xrn1基因參與調(diào)節(jié)羅伯茨綠僵菌附著胞的形成。3 討論

為研究Mr Xrn1基因敲除對(duì)羅伯茨綠僵菌產(chǎn)孢的影響，測(cè)定了不同菌株（WT、?Mr Xrn1和Comp）涂布接種于PDA上培養(yǎng)14 d后的產(chǎn)孢情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與WT和Comp相比較，?Mr Xrn1的產(chǎn)孢量明顯減少（圖3C）；進(jìn)一步的產(chǎn)孢量統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，WT、?Mr Xrn1和Comp產(chǎn)孢量分別為（3.34±0.09）×107、（0.81±0.04）×107和（3.05±0.16）×107孢子/cm2。與WT比較，?Mr Xrn1的產(chǎn)孢量下降了75.75%(P<0.05，圖3D），說(shuō)明Mr Xrn1基因參與調(diào)控羅伯茨綠僵菌的產(chǎn)孢。圖3 MrXrn1基因敲除對(duì)綠僵菌生長(zhǎng)與產(chǎn)孢的影響


本文編號(hào)：3286474