組蛋白去乙�；福╤istone deacetylase,HDAC）在植物生長、發(fā)育和脅迫應答反應中具有重要的作用。HDAC催化組蛋白去乙酰化,能夠影響染色質的結構,調節(jié)基因的轉錄。目前,有關木本植物HDAC在鹽脅迫應答反應中的功能研究鮮有報道。本研究從毛果楊中克隆了 HDAC的RPD3/HDA1亞家族基因HDA903,研究了其蛋白質序列、基因的表達與功能。（1）毛果楊HDA903基因的ORF序列長度為1506 bp,其編碼的蛋白質含有501個氨基酸,該蛋白質的等電點為5.26,屬于穩(wěn)定、親水性蛋白質。在該蛋白質的N端存在一個HDAC結構域,系統(tǒng)進化樹分析表明毛果楊HDA903蛋白與胡楊HDA19親緣關系較近。（2）利用熒光定量PCR方法分析HDA903基因的表達。HDA903基因能夠在毛果楊不同器官中表達,但不具有組織特異性。對HDA903基因在ABA、鹽和低溫脅迫下的表達進行分析,表明鹽脅迫抑制HDA903的表達,低溫誘導HDA903的表達,ABA也能夠調節(jié)HDA903的表達。（3）通過構建HDA903-GFP載體,利用基因槍轟擊法將融合基因導入洋蔥表皮細胞中,觀察熒光信號。結果顯... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?基因片段的ＰＣＲ擴增??注：Ｍ：?ＤＬ?２０００?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?／／ＤＪ９０５編碼區(qū)片段擴增結果??

殘基數(shù)目（Ａｓｐ＋Ｇｌｕ）為７７，正電氨基酸殘基數(shù)目??（Ａｒｇ＋Ｌｙｓ）為５３，不穩(wěn)定指數(shù)是３５．２９，此值不超過４０，即為穩(wěn)定蛋白質。綜上結果??表明，ＨＤＡ９０３蛋白為穩(wěn)定親水性蛋白。??ＰｒｏｔＳｃａｌｓ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ??３?＇?Ｉ?？?Ｕｐｈｏｂ．?／?Ｋｙｔｅ?Ｇ．?Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?——￣??Ｋ卿鴨議．??－４????????????０?１００?２００?３００?４００?５００??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??圖３?ＨＤＡ９０３蛋白的親／疏水性分析??２＿３．３＿２?ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜區(qū)及磷酸化位點分析??利用?ＴＭＨＭＭ?Ｓｅｒｖｅｒ?ｖ．?２．０?（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＴＭＨＭＭ／）在線軟件，??對ＨＤＡ９０３蛋白進行跨膜分析。結果表明，ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜螺旋個數(shù)為０，因此推??測ＨＤＡ９０３蛋白不存在跨膜區(qū)（圖４）。利用ＫｉｎａｓｅＰｈｏｓ?２．０??（ｈｔｔｐ：／／ｋｉｎａｓｅｐｈｏｓ．ｍｂｃ．ｎｃｔｕ．ｅｄｕ．ｔｗ／ｐｒｅｄｉｃｔ．ｐｈｐ）預測?ＨＤＡ９０３?蛋白可能發(fā)生憐酸化的位??點，結果顯示，ＨＤＡ９０３蛋白有６４個磷酸化位點，其中絲氨酸２７個，酪氨酸２３個，??蘇氨酸１４個。預測ＨＤＡ９０３蛋白受磷酸化調節(jié)。??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｆｏｒ?ＰｔＨＤＡ９０３??１．２????■?■?．???１?????０．８?■??＞＞??０．６?■??ｏ??Ｃｉ??０．４?■?．??０．２?■??０??１???１?１??

．??－４????????????０?１００?２００?３００?４００?５００??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??圖３?ＨＤＡ９０３蛋白的親／疏水性分析??２＿３．３＿２?ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜區(qū)及磷酸化位點分析??利用?ＴＭＨＭＭ?Ｓｅｒｖｅｒ?ｖ．?２．０?（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＴＭＨＭＭ／）在線軟件，??對ＨＤＡ９０３蛋白進行跨膜分析。結果表明，ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜螺旋個數(shù)為０，因此推??測ＨＤＡ９０３蛋白不存在跨膜區(qū)（圖４）。利用ＫｉｎａｓｅＰｈｏｓ?２．０??（ｈｔｔｐ：／／ｋｉｎａｓｅｐｈｏｓ．ｍｂｃ．ｎｃｔｕ．ｅｄｕ．ｔｗ／ｐｒｅｄｉｃｔ．ｐｈｐ）預測?ＨＤＡ９０３?蛋白可能發(fā)生憐酸化的位??點，結果顯示，ＨＤＡ９０３蛋白有６４個磷酸化位點，其中絲氨酸２７個，酪氨酸２３個，??蘇氨酸１４個。預測ＨＤＡ９０３蛋白受磷酸化調節(jié)。??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｆｏｒ?ＰｔＨＤＡ９０３??１．２????■?■?．???１?????０．８?■??＞＞??０．６?■??ｏ??Ｃｉ??０．４?■?．??０．２?■??０??１???１?１???０?１００?２００?３００?４００?５００??ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ???ｉｎｓｉｄｅ??ｏｕｔｓｉｄｅ????圖４?ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜區(qū)分析??２＿３．３．３?ＨＤＡ９０３蛋白二級結構與結構域分析??－１０－??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]表觀遺傳學研究進展[J]. 丁勇,許超,吳季輝,施蘊渝,臧建業(yè),蔡剛.  中國科學:生命科學. 2017(01)
[2]植物組蛋白乙酰基轉移酶的研究進展[J]. 夏德安,劉春娟,呂世博,張彥妮,劉奕佳,馬旭俊.  生物技術通報. 2015(07)
[3]植物表觀遺傳學研究進展[J]. 韋榮昌,唐其,馬小軍,趙歡,覃喜軍,涂冬萍.  北方園藝. 2013(18)
[4]組蛋白去乙�；敢种苿┭芯窟M展[J]. 譚玉梅,黃文淵,余聶芳.  藥學學報. 2009(10)



本文編號：3277272