目的:探討在人前列腺癌PC3細(xì)胞系中高表達(dá)的己糖激酶-2基因（HK2基因）對(duì)與PC3細(xì)胞系共培養(yǎng)體系里的輔助性T細(xì)胞1和輔助性T細(xì)胞2（TH1/TH2）的影響。方法:通過(guò)sh RNA構(gòu)建慢病毒感染PC3細(xì)胞系產(chǎn)生HK2基因敲低的PC3細(xì)胞系的穩(wěn)轉(zhuǎn)株（sh-HK2）,同時(shí)使用無(wú)義序列構(gòu)建慢病毒感染PC3細(xì)胞系獲得陰性對(duì)照細(xì)胞（NC）,q PCR與Western blot驗(yàn)證敲低結(jié)果。培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞（NC和sh-HK2）48 h后分離癌細(xì)胞獲得上清液,提取健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）,TH1實(shí)驗(yàn)組（sh-HK2組）:PBMCs在TH1誘導(dǎo)條件下使用培養(yǎng)過(guò)穩(wěn)轉(zhuǎn)株的上清液共培養(yǎng)48h,TH1陰性對(duì)照組（NC組）:PBMCs在TH1誘導(dǎo)條件下使用培養(yǎng)過(guò)陰性對(duì)照細(xì)胞的上清液共培養(yǎng)48h。TH2實(shí)驗(yàn)組（sh-HK2組）,TH2陰性對(duì)照組（NC組）誘導(dǎo)條件變更為TH2誘導(dǎo)條件,其他不變。48h后分光光度儀檢測(cè)各共培養(yǎng)體系中乳酸水平。然后提取各組中PBMCs使用植物血凝素-M（PHA-M）另外培養(yǎng)24 h,Elisa法檢測(cè)TH1誘導(dǎo)條件下各組中PBMCs的IFN-γ和TH2誘導(dǎo)條件下各組PBM... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定HK2基因mRNA表達(dá)Figure1DetectionofHK2mRNAexpressionbyreal-timequantitativePCR

安徽醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文12sh-RNA干擾HK2基因后，HK2蛋白表達(dá)降低圖2WB測(cè)定HK2蛋白表達(dá)Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC組：陰性對(duì)照組PC3細(xì)胞；sh-RNA組：HK2基因敲低實(shí)驗(yàn)組PC3細(xì)胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培養(yǎng)體系中乳酸含量圖3TH1共培養(yǎng)體系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

安徽醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文12sh-RNA干擾HK2基因后，HK2蛋白表達(dá)降低圖2WB測(cè)定HK2蛋白表達(dá)Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC組：陰性對(duì)照組PC3細(xì)胞；sh-RNA組：HK2基因敲低實(shí)驗(yàn)組PC3細(xì)胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培養(yǎng)體系中乳酸含量圖3TH1共培養(yǎng)體系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]HK2基因在前列腺癌中的表達(dá)及其對(duì)前列腺癌細(xì)胞惡性表型的影響[J]. 陶陶,沈洲,項(xiàng)平,黃濤,陳恕求,宣強(qiáng),肖峻.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2017(02)
[2]惡性腫瘤患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及Th1、Th2細(xì)胞的檢測(cè)和臨床意義[J]. 張瑞萍,徐冰心,王社論,鄭成中,董青,翟樹森,周學(xué)慧,高云閣.  中國(guó)臨床醫(yī)學(xué). 2012(06)



本文編號(hào)：3255937