褐藻多酚是羊棲菜中含量較高的一類具有生物活性的天然產物,從結構角度分析,盡管結構種類多樣,但其僅由間苯三酚單體聚合而成。對長囊水云的研究表明,聚酮合酶基因是該單體生物合成途徑中的關鍵基因。同源搜索結果發(fā)現(xiàn),羊棲菜中存在一個聚酮合酶基因,與前者具有極高同源性;除此之外,羊棲菜中還存在著另外兩個聚酮合酶基因,但目前對它們的功能還不甚了解。本文從羊棲菜聚酮合酶的基因克隆、異源表達和酶學性質分析三方面進行探究:羊棲菜中存在3個聚酮合酶基因,分別是SfPKS1、SfPKS2和SfPKS3,克隆這三個基因后在大腸桿菌中進行了異源表達,并對純化后的重組蛋白進行了酶學性質的研究。同源性分析羊棲菜的三個PKS基因表明:SfPKS2和SfPKS3具有較高的相似度,且與賓得馬尾藻SbPKS和水云EsiPKS1具有較高同源性;同時,SfPKS1、2和3的底物識別位點和催化活性位點的氨基酸序列高度保守。SfPKS的催化底物測試了兩種類型的CoA—直鏈烷基CoA和芳香類CoA,結果顯示SfPKS能以芳香類CoA作為反應底物合成相應的產物。對羊棲菜PKS的研究有助于進一步挖掘羊棲菜中其他聚酮類化合物,為羊棲菜相關天... 

【文章來源】：溫州大學浙江省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

多酚結構式Fig.1-1Congstucionofpolyphenols

圖1-2 PKS的結構域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type IS結構域包括酰基轉移酶（Acyltransferase，AT），酮縮酶（Ketos酮還原酶（Ketoreductase，KR），脫水酶（Dehydratase，DH）noylreductase，ER），酰基轉移蛋白（Acy Carrier Protein，Ahioseterase，TE）[110]。AT和KS結構域負責聚酮類化合物鏈的化反應過程中，每一次延伸單元的疊加都會有AT的參與[111]，構域，KS結構中的乙�；Y合區(qū)域決定I型和II型PKS催化產、DH、ER結構域主要負責產物鏈的修飾作用，KR修飾多肽羰 則催化多肽脫水，在α和β碳間形成雙鍵，ER結構域還原α,β烯，TE結構域在多肽合成的最后催化脫水或環(huán)化，ACP是一個120 AA），負責產物在酶激活位點間的傳遞，I型和II型的P。圖1-3繪制了 PKS 結構域標準催化鏈的延伸和修飾[110]。

圖1-2 PKS的結構域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type III PKSPKS結構域包括酰基轉移酶（Acyltransferase，AT），酮縮酶（Ketosynthase，KS），酮還原酶（Ketoreductase，KR），脫水酶（Dehydratase，DH），烯酰還原酶（Enoylreductase，ER），酰基轉移蛋白（Acy Carrier Protein，ACP），硫酯酶（Thioseterase，TE）[110]。AT和KS結構域負責聚酮類化合物鏈的延長，在I型PKS催化反應過程中，每一次延伸單元的疊加都會有AT的參與[111]，KS是PKS的必須結構域，KS結構中的乙�；Y合區(qū)域決定I型和II型PKS催化產物的長度[110]。KR、DH、ER結構域主要負責產物鏈的修飾作用，KR修飾多肽羰基的還原[112]，DH 則催化多肽脫水，在α和β碳間形成雙鍵，ER結構域還原α,β烯�；娠柡挺粒骆I，TE結構域在多肽合成的最后催化脫水或環(huán)化，ACP是一個小分子蛋白（60～120 AA），負責產物在酶激活位點間的傳遞，I型和II型的PKS都含有ACP[113]。圖1-3繪制了 PKS 結構域標準催化鏈的延伸和修飾[110]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]羊棲菜蛋白質提取及功能性研究[J]. 龐庭才,胡上英,范和良,黃海,林麗丹.  中國釀造. 2017(09)
[2]海洋褐藻羊棲菜（Sargassum fusiforme）中馬尾藻甾醇、巖藻甾醇的分類純化及抗菌、抗氧化活性研究[J]. 孫瑜,丁國芳,徐銀峰.  海洋與湖沼. 2017(03)
[3]羊棲菜非多糖成分及其藥理活性研究進展[J]. 秦華夏,廖志勇.  安徽農業(yè)科學. 2017(08)
[4]響應面法優(yōu)化酶輔助提取羊棲菜多酚工藝及其抗氧化性研究[J]. 劉楠,曾帥,孫永,牟偉麗,周德慶.  食品安全質量檢測學報. 2017(01)
[5]羊棲菜多糖的提取和抗氧化活性研究[J]. 何丹,張旭,肖保衡,吳曉輝,吳明江.  海洋科學. 2016(12)
[6]正交試驗法優(yōu)化酶輔助提取羊棲菜多酚工藝[J]. 曾帥,周德慶,劉楠.  南方農業(yè)學報. 2016(09)
[7]對香豆酰輔酶A酯生物合成及純化方法[J]. 潘琛,任百光,蓋穎.  北京林業(yè)大學學報. 2016(03)
[8]羊棲菜成分以及藥理研究進展[J]. 王百龍,孫稚穎,周鳳琴.  山東中醫(yī)雜志. 2015(09)
[9]羊棲菜多酚提取工藝優(yōu)化[J]. 何傳輝,何傳波,魏好程,王姣,熊何健.  食品安全質量檢測學報. 2015(08)
[10]羊棲菜活性多糖的提取與生物活性研究進展[J]. 丁浩淼,謝作亮,謝琰,汪財生,顧筱筱,錢國英.  藥物生物技術. 2015(04)

碩士論文
[1]羊棲菜多糖的提取分離、生物活性及結構鑒定[D]. 劉洪超.上海海洋大學 2017
[2]羊棲菜多糖的化學修飾及生物活性研究[D]. 陳冰潔.浙江工商大學 2017
[3]羊棲菜中萜類成分的提取與純化方法研究[D]. 徐忠明.浙江工商大學 2015
[4]不同品系羊棲菜形態(tài)和營養(yǎng)成分的初步分析[D]. 崔海峰.東北林業(yè)大學 2013
[5]羊棲菜多糖的提取和純化研究[D]. 周峙苗.浙江工業(yè)大學 2004
[6]馬尾藻多糖與多酚的提取及其活性研究[D]. 周貞兵.廣西大學 2002



本文編號：3223156