氨基酸通透酶（AAP）在植物吸收和轉運氨基酸的過程中發(fā)揮至關重要的作用。擬南芥AtAAP1是植物中發(fā)現(xiàn)的第一個氨基酸轉運蛋白,在水稻、玉米、馬鈴薯、豌豆、蠶豆、菜豆等農作物中也有較多報道。目前,關于大豆GmAAP的研究卻較為少見,AAP能提高豆科植物對外源氮的吸收與利用率,增加種子內貯藏蛋白含量,進而提升大豆品質。本研究從大豆中成功克隆出GmAAP基因,對其進行生物信息學分析和亞細胞定位,明確該基因行使功能的區(qū)域;同時分別在大豆和轉基因擬南芥中對該基因的表達模式進行研究;通過20種編碼氨基酸親和試驗,結合轉GmAAP基因擬南芥種子中20種編碼氨基酸含量的試驗結果,明確GmAAP蛋白對氨基酸的吸收特性;通過單一氨基酸培養(yǎng)試驗,測定轉基因大豆發(fā)根GmAAP基因表達和氮代謝關鍵酶活性,旨在解析GmAAP基因與氮代謝的關系。試驗結果可為GmAAP功能的研究奠定基礎,同時也為大豆氮素的高效利用提供候選基因。主要結果如下:1.以大豆Williams 82為試驗材料,通過RT-PCR同源克隆到GmAAP基因,其開放閱讀框長度為1440 bp,編碼479個氨基酸。生物信息學分析表明,GmAAP蛋白分子... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大豆葉片總RNA電泳結果

將亮帶切膠回收后與 pCAMBIA3301-GFP 載體連接，連接產物轉化大腸桿菌 DH挑取的單菌落擴繁，經菌液 PCR 驗證得到的陽性克隆（圖 2.3）測序后與 phytozo2.1 數(shù)據庫中的 GmAAP 序列比對，結果表明成功克隆到長度為 1440 bp 的 GmAAP，并完成了表達載體 pCAMBIA3301-GFP-GmAAP 的構建。

將亮帶切膠回收后與 pCAMBIA3301-GFP 載體連接，連接產物轉化大腸桿菌 DH挑取的單菌落擴繁，經菌液 PCR 驗證得到的陽性克�。▓D 2.3）測序后與 phytozo2.1 數(shù)據庫中的 GmAAP 序列比對，結果表明成功克隆到長度為 1440 bp 的 GmAAP，并完成了表達載體 pCAMBIA3301-GFP-GmAAP 的構建。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Overexpression of GmProT1 and GmProT2 increases tolerance to drought and salt stresses in transgenic Arabidopsis[J]. GUO Na,XUE Dong,ZHANG Wei,ZHAO Jin-ming,XUE Chen-chen,YAN Qiang,XUE Jin-yan,WANG Hai-tang,ZHANG Yu-mei,XING Han.  Journal of Integrative Agriculture. 2016(08)
[2]大豆氨基酸透性酶基因GmAAP2-like 1的克隆及功能初探[J]. 李美美,夏銅梅,王丹,梅圓圓,王寧寧.  植物生理學報. 2016(01)
[3]菲與NH4+-N和NO3--N共存對作物根系硝酸還原酶活性的影響[J]. 袁嘉韓,易修,顧鎖娣,占新華,周立祥,徐仁扣.  南京農業(yè)大學學報. 2014(01)
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[5]高等植物中的谷氨酸脫氫酶及其生理作用[J]. 黃國存,田波.  植物學通報. 2001(04)



本文編號：3216366