目的觀察消巖湯對WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平變化,探索消巖湯抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7細胞增殖的分子機制。方法 WISP2/CCN5 shRNA慢病毒質粒轉染MCF-7細胞,構建WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞系,采用高、中、低濃度的消巖湯孵育WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞24、36及48 h后,檢測細胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平。結果 WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖抑制率低于空白組和空載組（P<0.05）,消巖湯干預組細胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲減組（P<0.05）;高濃度消巖湯孵育WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞48 h組細胞增殖抑制率高于相同濃度孵育24 h組（P<0.05）。WISP2/CCN5基因敲減組Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白組和空載組（P<0.05,P<0.05）,而p27Kip1 mRNA... 

【文章來源】：廣東醫(yī)學. 2020,41(19)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞株
    1.2 實驗藥物
    1.3 試劑
    1.4 方法
        1.4.1 MCF-7細胞培養(yǎng)
        1.4.2 病毒轉染構建WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞
        1.4.3 消巖湯顆粒劑溶解液配制和溶解
        1.4.4 MTT法觀察消巖湯對MCF-7細胞增殖的抑制作用
        1.4.5 熒光定量RT-PCR法檢測相關因子mRNA水平
        1.4.6 采用Western blot檢測相關因子蛋白水平
    1.5 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 消巖湯抑制WISP2/CCN5基因敲減的MCF-7細胞增殖,并與消巖湯濃度和作用時間相關
    2.2 消巖湯在mRNA水平對WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 的調控作用
    2.3 消巖湯在蛋白水平對WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1的調控作用
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3197760