[目的]構(gòu)建Wnt3a基因沉默的骨質(zhì)疏松（osteoporosis,OP）大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）體系,研究 Wnt 通路中 Wnt3a及β-catenin關(guān)鍵分子的表達(dá),并探索老鸛草素干預(yù)其表達(dá)的作用。[方法]1.分離去卵巢（ovariectomy,OVX）大鼠的BMSCs,分為假手術(shù)大鼠組、模型大鼠組、模型組BMSCs給予老鸛草素（10-9mol/L）處理,用茜素紅及ALP活性檢測(cè)驗(yàn)證老鸛草素對(duì)BMSCs是否有成骨分化的作用。2.RNA芯片技術(shù)檢測(cè)各組BMSCs基因表達(dá)譜差異,對(duì)上調(diào)差異基因的表達(dá)進(jìn)行篩選。并與模型組作比較,對(duì)老鸛草干預(yù)后變化的基因,特別是與BMSCs成骨分化相關(guān)的關(guān)鍵基因進(jìn)行cluster聚類、GO分析、以及pathway功能分布。3.確定上述老鸛草素干預(yù)組中表達(dá)上調(diào)的關(guān)鍵基因,采用RNAi沉默技術(shù),針對(duì)目的基因設(shè)計(jì)構(gòu)建3條干擾序列,并包裝慢病毒,以慢病毒作載體攜帶上述沉默基因轉(zhuǎn)染入BMSCs內(nèi),構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)BMSCs細(xì)胞系,并用RTQ-PCR驗(yàn)證。4.用老鸛草素進(jìn)行干預(yù)穩(wěn)轉(zhuǎn)BMSCs細(xì)胞14d后,采用... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表(以字母順序排列)
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào)：3192580