獨(dú)特的芳香氣味是黃瓜的重要特色。在黃瓜的主體香氣成分中,C6和C9醛及相應(yīng)的醇類具備不同的香氣特征,其含量及比例對黃瓜果實(shí)風(fēng)味有重要的影響。脂氧合酶（Lipoxygenase,LOX）是黃瓜果實(shí)醛類香氣形成過程上游的第一個(gè)關(guān)鍵酶,其對游離的脂肪酸的催化位置決定了黃瓜果實(shí)中C6、C9醛的含量高低。前期的研究發(fā)現(xiàn),在黃瓜果實(shí)中表達(dá)的LOXs基因有12個(gè),但哪一個(gè)成員參與到C9醛類的產(chǎn)生尚不明晰,因此,本試驗(yàn)在結(jié)合黃瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期醛類香氣含量以及不同CsLOXs的表達(dá)模式的基礎(chǔ)上,推測CsLOX2基因（C9型）參與到C9醛的合成中,并對CsLOX2基因的功能進(jìn)行了初步研究,得到以下結(jié)論:1.對黃瓜果實(shí)發(fā)育進(jìn)程中的C6和C9醛類物質(zhì)含量的變化進(jìn)行了分析結(jié)果表明,C6、C9醛和相應(yīng)醇的含量在果實(shí)發(fā)育前期（0⁶ d）含量較高,花后8 d顯著下降;其中C6醛和相應(yīng)的醇在果實(shí)發(fā)育前期（0⁸ d）含量較高,占總?cè)╊惖?2%²3%,而在果實(shí)發(fā)育的后期（10¹4 d）C9醛和相應(yīng)的醇含量較高,占總?cè)╊愇镔|(zhì)的95%左右... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 脂氧合酶的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
    1.2 黃瓜果實(shí)中的芳香物質(zhì)成分及合成途徑
        1.2.1 黃瓜果實(shí)中的芳香物質(zhì)
        1.2.2 黃瓜果實(shí)芳香物質(zhì)的合成途徑
    1.3 植物體內(nèi)脂氧合酶的生理功能
        1.3.1 脂氧合酶參與果實(shí)揮發(fā)物質(zhì)的形成
        1.3.2 脂氧合酶參與植物成熟衰老的過程
        1.3.3 脂氧合酶參與植物抗病抗逆過程
        1.3.4 脂氧合酶參與植物發(fā)育的其他過程
        1.3.5 黃瓜脂氧合酶研究現(xiàn)狀
    1.4 研究目的與意義
第二章 黃瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期CsLOXs表達(dá)模式和C6、C9醛類含量分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 試劑及儀器
        2.1.3 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 黃瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期C6醛和C9醛含量分析
        2.2.2 黃瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期CsLOXs基因的表達(dá)量分析
        2.2.3 黃瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期CsLOXs基因表達(dá)與香氣物質(zhì)含量的關(guān)系
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 黃瓜脂氧合酶基因CsLOX2的克隆和表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.2.2 農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化
        3.2.3 過表達(dá)載體pB2HA-CsLOX2對黃瓜的遺傳轉(zhuǎn)化
        3.2.4 干擾載體pART27-CsLOX2RNAi對黃瓜的遺傳轉(zhuǎn)化
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 PMD19-T載體的連接
        3.3.2 CsLOX2過表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.3.3 Cs LOX2 干擾載體的構(gòu)建
        3.3.4 農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化
        3.3.5 過表達(dá)載體對黃瓜的遺傳轉(zhuǎn)化
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 黃瓜CsLOX2原核表達(dá)載體構(gòu)建及蛋白誘導(dǎo)
    4.1 載體和試劑
        4.1.1 載體和菌株
        4.1.2 試劑
    4.2 方法
        4.2.1 引物設(shè)計(jì)及目的片段擴(kuò)增
        4.2.2 目的片段和表達(dá)載體PET-32a(+)雙酶切
        4.2.3 T4連接基因片段和表達(dá)載體
        4.2.4 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)
        4.2.5 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至表達(dá)菌株BL
        4.2.6 重組蛋白的誘導(dǎo)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 重組質(zhì)粒32a-CsLOX2的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化
        4.3.2 重組蛋白的誘導(dǎo)
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]過量表達(dá)蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因小麥的耐旱性[J]. 胡夢蕓,李輝,龐建周,劉茜,張穎君,孫麗靜.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(08)
[2]不同基因型黃瓜果實(shí)芳香物質(zhì)組成及含量差異研究[J]. 郝麗寧,陳書霞,王聰穎,陳巧,萬旭花,申曉青,程智慧,孟煥文.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(06)
[3]RNA干擾載體構(gòu)建方法的研究進(jìn)展[J]. 粟挺,劉愛玲,陳信波.  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(19)
[4]果實(shí)香氣成分及其形成研究進(jìn)展[J]. 魏長賓,劉勝輝,臧小平,孫光明.  熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(03)
[5]日光溫室黃瓜發(fā)育過程中主要芳香物質(zhì)和脂肪酸含量的變化[J]. 徐坤范,王明林,艾希珍.  西北植物學(xué)報(bào). 2009(02)
[6]黃瓜果實(shí)脂氧合酶活性測定方法的建立[J]. 李強(qiáng),吳曉露,李紅偉,杭梅,李旗峰,朱丹.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(05)
[7]熱水預(yù)處理對草莓果實(shí)采后生理與品質(zhì)的影響[J]. 杜正順,鞏惠芳,汪良駒,李百健.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2008(01)
[8]1-MCP處理對黃花梨果實(shí)采后生理的影響[J]. 李志強(qiáng),汪良駒,王中華.  西北植物學(xué)報(bào). 2007(11)
[9]水稻中以亞麻酸為底物的脂氧合酶活性測定[J]. 姚鋒先,曾曉春,蔣海燕,方加海,吳曉玉.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(02)
[10]黃瓜芳香物質(zhì)的研究進(jìn)展[J]. 劉春香,何啟偉.  園藝學(xué)報(bào). 2004(02)

博士論文
[1]黃瓜風(fēng)味品質(zhì)的構(gòu)成因素及部分因素遺傳參數(shù)的研究[D]. 劉春香.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號：3167967