斑痣懸繭蜂Meteorus pulchricornis屬膜翅目繭蜂科,是斜紋夜蛾Spodoptera litura、甜菜夜蛾Spodoptera exigua等鱗翅目害蟲的重要優(yōu)勢寄生性天敵,寄主范圍廣,是控制鱗翅目害蟲數(shù)量的重要自然因子。近年來,隨著各種測序技術(shù)、分子生物學(xué)及生物信息學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,一大批昆蟲的化學(xué)感受基因被鑒定出來,極大的豐富了我們對昆蟲化學(xué)感受機(jī)制的認(rèn)識,但已報(bào)道的案例多集中在鱗翅目、鞘翅目等昆蟲中,對膜翅目寄生性昆蟲的化學(xué)感受研究仍較為缺乏。寄生蜂的化學(xué)感受系統(tǒng)在其取食、交配和產(chǎn)卵等行為中具有舉足輕重的作用。寄生蜂在復(fù)雜的化學(xué)環(huán)境中成功定位寄主是其成功寄生害蟲、脅迫害蟲種群動態(tài)及自身繁衍的基礎(chǔ)條件,對寄生蜂化學(xué)感受機(jī)制的研究有助于我們深入了解寄生蜂搜尋行為生態(tài)學(xué)機(jī)制,理清寄生效率與化學(xué)信號介導(dǎo)的寄生蜂寄主識別間的關(guān)系,也對更好的利用寄生蜂開展害蟲生防實(shí)踐具有重要的參考價(jià)值。本論文研究內(nèi)容包括:（1）通過二代轉(zhuǎn)錄組測序,從斑痣懸繭蜂觸角中獲得一系列的化學(xué)感受基因,對氣味結(jié)合蛋白（OBPs）,化學(xué)感受蛋白（CSPs）,感覺神經(jīng)元膜蛋白（SNMPs）,氣味受體（OR... 

【文章來源】：江蘇科技大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 昆蟲觸角感器和化學(xué)感受機(jī)制
    1.2 產(chǎn)卵器的化學(xué)感受基因功能研究進(jìn)展
    1.3 昆蟲化學(xué)感受基因的研究進(jìn)展
        1.3.1 氣味結(jié)合蛋白（Odorant binding proteins,OBPs）的研究進(jìn)展
        1.3.2 化學(xué)感受系統(tǒng)中其他主要的化學(xué)感受基因
    1.4 氣味降解酶（ODEs）
        1.4.1 羧酸酯酶（Carboxylesterases, CXEs）
        1.4.2 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（Glutathione S transferases,GSTs）
    1.5 研究對象
    1.6 研究目的和主要內(nèi)容
        1.6.1 研究目的和意義
        1.6.2 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
第2章 斑痣懸繭蜂觸角化學(xué)感受基因及氣味降解酶基因的鑒定、序列分析及表達(dá)譜
    2.1 斑痣懸繭蜂觸角化學(xué)感受基因的鑒定和同源性分析
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 主要試劑和設(shè)備
        2.1.3 總RNA的提取
        2.1.4 觸角cDNA文庫的構(gòu)建和Illumina測序
        2.1.5 觸角序列的組裝和功能注釋
        2.1.6 斑痣懸繭蜂化學(xué)感受基因及氣味降解酶基因的鑒定
        2.1.7 觸角化學(xué)感受基因及氣味降解酶基因的序列比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
        2.1.8 觸角MpulOBPs,MpulGRs,MpulCXEs和MpulGSTs的組織表達(dá)譜分析
        2.1.9 數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 Illumina測序和轉(zhuǎn)錄組組裝
        2.2.2 觸角unigenes的GO和KOG分類
        2.2.3 觸角氣味結(jié)合蛋白（OBPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.4 觸角化學(xué)感受蛋白（CSPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.5 觸角化學(xué)感受受體的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.6 觸角感受神經(jīng)元膜蛋白（SNMPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.7 觸角羧酸酯酶（CXEs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.8 觸角谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSTs）的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        2.2.9 觸角MpulOBPs相對表達(dá)量分析
        2.2.10 觸角MpulGRs組織表達(dá)譜分析
        2.2.11 觸角MpulCXEs和MpulGSTs的組織表達(dá)譜分析
    2.3 討論
    2.4 本章小結(jié)
第3章 斑痣懸繭蜂產(chǎn)卵器感器觀測和化學(xué)感受基因的鑒定
    3.1 材料和方法
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 主要試劑和設(shè)備
    3.2 斑痣懸繭蜂產(chǎn)卵器形態(tài)和感器結(jié)構(gòu)的觀察
    3.3 斑痣懸繭蜂產(chǎn)卵器化學(xué)感受基因的鑒定和序列分析
        3.3.1 組織總RNA提取
        3.3.2 產(chǎn)卵器cDNA文庫的構(gòu)建和Illumina測序
        3.3.3 產(chǎn)卵器序列組裝和功能注釋
        3.3.4 產(chǎn)卵器化學(xué)感受基因的鑒定
        3.3.5 產(chǎn)卵器化學(xué)感受基因的同源性比對和系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.3.6 產(chǎn)卵器氣味結(jié)合蛋白（OBPs）基因的組織表達(dá)譜分析
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 產(chǎn)卵器的基本結(jié)構(gòu)
        3.4.2 產(chǎn)卵器Illumina測序和unigenes序列組裝
        3.4.3 產(chǎn)卵器unigenes功能注釋
        3.4.4 產(chǎn)卵器氣味結(jié)合蛋白（OBPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.5 產(chǎn)卵器化學(xué)感受蛋白（CSPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.6 產(chǎn)卵器氣味受體（ORs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.7 產(chǎn)卵器離子受體（IRs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.8 產(chǎn)卵器味覺受體（GRs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.9 產(chǎn)卵器感覺神經(jīng)元膜蛋白（SNMPs）基因的鑒定、序列特征及進(jìn)化樹分析
        3.4.10 產(chǎn)卵器氣味結(jié)合蛋白（OBPs）基因的組織表達(dá)譜分析
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第4章 MpulOBP9的原核表達(dá)及蛋白純化
    4.1 主要試劑和設(shè)備
    4.2 MpulOBP9的體外表達(dá)和蛋白純化
        4.2.1 組織RNA提取和cDNA第一條鏈合成
        4.2.2 引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增
        4.2.3 重組表達(dá)載體的構(gòu)建
        4.2.4 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和表達(dá)
        4.2.5 重組蛋白的純化和腸激酶酶切
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 重組質(zhì)粒的鑒定
        4.3.2 目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)和可溶性分析
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]混腔室繭蜂觸角微觀結(jié)構(gòu)的掃描電子顯微鏡觀察[J]. 盛晟,鄭煜,周雨,廖成武,吳福安.  蠶業(yè)科學(xué). 2016(06)
[2]鈍葉榕三種進(jìn)果榕小蜂雌性觸角的結(jié)構(gòu)、感器及其適生意義[J]. 李宗波,楊培,楊大榮.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2013(02)
[3]應(yīng)用周氏嚙小蜂防治美國白蛾的試驗(yàn)[J]. 付振科,李偉.  防護(hù)林科技. 2010(01)
[4]斜紋夜蛾側(cè)溝繭蜂對寄主齡期的選擇[J]. 王奎武,蔣杰賢,游蘭韶,陳永年,蔣祝瑞.  湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2001(05)

博士論文
[1]斑痣懸繭蜂Meteorus pulchricornis寄主選擇與發(fā)育策略的研究[D]. 劉亞慧.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3158177