目的:探索Nedd4L基因?qū)Υ笫蟾涡菭罴?xì)胞TGF-β1/Smad信號(hào)通路的影響及意義。方法:1.質(zhì)粒最佳作用濃度將不同濃度（50nmol/L、30nmol/L、10nmol/L、0nmol/L）帶熒光的陰性質(zhì)粒pEGFP-N1或FAM-Negative siRNA借由脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑LipofectamineTM 2000轉(zhuǎn)染入HSC-T6 24小時(shí)后,在倒置熒光顯微鏡下觀察各濃度組的轉(zhuǎn)染率即為帶綠色熒光細(xì)胞占總細(xì)胞的比例,明確質(zhì)粒最佳轉(zhuǎn)染濃度。2.TGF-β1對(duì)HSC-T6中Nedd4L表達(dá)的影響首先用不同濃度TGF-β1（0 ng/ml、1 ng/ml、2.5 ng/ml、5 ng/ml）刺激HSC-T624小時(shí)后,用RT-PCR方法檢測(cè)Collagen-ⅠmRNA及Nedd4L mRNA的表達(dá),以建立最佳體外肝纖維化模型;隨后選取最佳濃度TGF-β1刺激HSC-T6 0小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)后,同樣用RT-PCR方法檢測(cè)Collagen-ⅠmRNA及Nedd4L mRNA的表達(dá),以明確TGF-β1對(duì)HSC-T6中Nedd4L表達(dá)的影響。3.Nedd4L基因過(guò)表達(dá)對(duì)HSC... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    1 材料
        1.1 細(xì)胞來(lái)源
        1.2 細(xì)胞培養(yǎng)材料
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器設(shè)備
        1.5 主要溶液及配制
    2 方法
        2.1 大鼠肝星狀細(xì)胞的復(fù)蘇與培養(yǎng)
        2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        2.3 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染
        2.4 REAL-TIME PCR檢測(cè)NEDD4L、SMAD3、P-SMAD3、COLLAGEN-Ⅰ各MRNA的含量
        2.5 WESTERN BLOT檢測(cè)NEDD4L、SMAD3、P-SMAD3、COLLAGEN-Ⅰ蛋白的表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
討論
存在問(wèn)題和需要進(jìn)一步研究的問(wèn)題
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新疆哈薩克族人神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育調(diào)控樣蛋白4基因rs3865418多態(tài)性與中心性肥胖的相關(guān)性[J]. 王紅梅,洪靜,羅文利,常建航,姚曉光,李南方.  中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(05)
[2]神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育調(diào)控樣蛋白4基因多態(tài)性與哈薩克族高血壓病的關(guān)聯(lián)研究[J]. 王紅梅,李南方,洪靜,姚曉光,羅文利,常建航.  中華心血管病雜志. 2010 (10)
[3]神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育調(diào)控樣基因rs4149601多態(tài)性與新疆哈薩克族人群中心性肥胖的關(guān)聯(lián)研究[J]. 王紅梅,李南方,姚曉光,洪靜,羅文利,常建航.  中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志. 2010 (06)



本文編號(hào)：3152384