發(fā)布時間：2021-04-21 05:46

　　溶瘤病毒（Oncolytic viruses）是一種重要的癌癥免疫治療策略。經(jīng)過基因編輯技術改造后的二型單純皰疹病毒（herpes simplex virus type II,HSVⅡ）能夠選擇性的在腫瘤細胞中復制和增殖,直接殺死腫瘤細胞。伴隨溶瘤病毒的增殖:a)腫瘤微環(huán)境對抗腫瘤的免疫機制得以部分解除;b)腫瘤細胞在裂解時釋放特異性的腫瘤抗原激活腫瘤微環(huán)境中特異性的抗腫瘤免疫反應;c)溶瘤病毒在腫瘤微環(huán)境中表達增強抗腫瘤免疫反應的細胞因子等。白介素15（Interleukin-15,IL-15）是14至15kDa的細胞因子。IL-15可通過抗體依賴性介導的細胞毒性（antibody dependent cell mediated cytotoxicity,ADCC）效應增強自然殺傷細胞（NK）和巨噬細胞的抗腫瘤作用。IL-15與特異性靶向腫瘤細胞的抗體聯(lián)合治療時,IL-15能夠上調(diào)NK細胞和巨噬細胞上Fc受體表達,抗體與腫瘤的抗原結(jié)合后,抗體的Fc片段與Fc受體結(jié)合時促進NK細胞和巨噬細胞殺傷腫瘤細胞。CRISPR/Cas9（clustered regular interspaced... 

【文章來源】：湖北工業(yè)大學湖北省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
    1.1 惡性腫瘤的研究和治療現(xiàn)狀
    1.2 溶瘤病毒免疫治療歷史
    1.3 溶瘤病毒療法的機遇和挑戰(zhàn)
    1.4 基因編輯技術
    1.5 白介素15
    1.6 目的和意義
第2章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗儀器與設備
        2.1.3 溶液配方
        2.1.4 細胞系及病毒株
        2.1.5 小鼠
    2.2 實驗方法
        2.2.1 質(zhì)粒構(gòu)建
        2.2.2 oHSV2 的生產(chǎn)
        2.2.3 腫瘤細胞復蘇
        2.2.4 腫瘤細胞培養(yǎng)
        2.2.5 病毒構(gòu)建
        2.2.6 病毒基因PCR分析
        2.2.7 IL-15ELISA分析
        2.2.8 病毒體外殺傷腫瘤細胞
        2.2.9 qPCR分析病毒感染腫瘤細胞后PD-L1 的表達
        2.2.10 CT26 腫瘤模型建立
        2.2.11 統(tǒng)計方法
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 CRISPR/CAS9 構(gòu)建OHSV2-MIL-15CFP時出現(xiàn)了非同源重組修復（NHEJ）
    3.2 鑒定OHSV2-MIL-15CFP
    3.3 在人源的腫瘤細胞中OHSV2-MIL-15CFP具有更強的復制能力
    3.4 OHSV2-MIL-15CFP和OHSV2-HGM-CSF在體外感染腫瘤細胞后都能在MRNA水平上調(diào)腫瘤細胞的PD-L1 表達
    3.5 在CT26 小鼠模型上,OHSV2-MIL-15CFP能夠抑制腫瘤的生長并且延長小鼠的生存期
第4章 討論與展望
參考文獻
致謝



本文編號：3151177