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小麥抗赤霉病QTL Qfhb.yzu-4B候選基因TaG3LEA的克隆和生物信息學(xué)分析

發(fā)布時間:2021-04-11 19:28
  本課題組前期的蛋白組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)一個小麥赤霉病抗性相關(guān)基因,該基因編碼三型胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白(G3LEA),該蛋白只在抗病品種中富集。已有研究表明,該基因在高等植物中廣泛的參與了生長、發(fā)育及各種逆境抵御的調(diào)控過程。本研究利用美國國立生物技術(shù)信息中心數(shù)據(jù)庫(NCBI)獲取小麥TaG3LEA基因CDS序列并和測序小麥品種“中國春”參考序列進(jìn)行比對,該基因位于4B染色體上已知抗赤霉病QTL區(qū)間。根據(jù)前期關(guān)聯(lián)分析結(jié)果,日本小麥品種TOKAII66在4B染色體上已知抗赤霉病QTL上攜帶有利變異,而美國小麥品種Clark攜帶不利等位變異,然后設(shè)計了擴(kuò)增的引物并分別擴(kuò)增小麥品種TOKAII66和Clark的TaG3LEA基因,將擴(kuò)增的特異片段回收、克隆和測序,根據(jù)堿基差異開發(fā)了可區(qū)別抗、感等位變異的基因特異性標(biāo)記并利用開發(fā)的功能標(biāo)記對244個小麥品種構(gòu)成的自然群體進(jìn)行基因型分析,明確不同等位變異在自然群體中的分布。接著對接種赤霉菌和接種綠豆湯的小麥TOKAII66和蘇麥3號(在目標(biāo)位點(diǎn)上攜帶不利等位變異)做不同時期的表達(dá)模式分析;采用生物信息學(xué)方法解析了小麥TaG3LEA家族基因的進(jìn)化。主要結(jié)果如下... 

【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

小麥抗赤霉病QTL Qfhb.yzu-4B候選基因TaG3LEA的克隆和生物信息學(xué)分析


圖1:在中國春預(yù)測的的基因結(jié)構(gòu)

小麥抗赤霉病QTL Qfhb.yzu-4B候選基因TaG3LEA的克隆和生物信息學(xué)分析


PCR檢測DNAFigZAgarose酬electroPhoresls

序列,響應(yīng)元件,揚(yáng)州大學(xué),順式作用元件


30?揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文測序結(jié)果表明TOKAII66和Clark之間僅存在1個SNP變異,該SNP位于起始密碼上游約1?kb的位置,是順式作用元件EBOXBNNAPA?ABRE?(ABA響應(yīng)元件)的核心基。隨后,我們將該SNP轉(zhuǎn)化為CAPS標(biāo)記,標(biāo)記交由華大基因公司合成。??中國春參考序列??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國小麥赤霉病的危害及抗性遺傳改良[J]. 程順和,張勇,別同德,高德榮,張伯橋.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(05)
[2]大豆LEA基因家族全基因組鑒定、分類和表達(dá)[J]. 李樂,許紅亮,楊興露,李雅軒,胡英考.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(19)
[3]第三組胚胎晚期豐富蛋白lea3基因研究概述[J]. 湯曉倩,于麗霞,武曉璐,鄢波.  生命科學(xué). 2010(06)
[4]LEA蛋白研究進(jìn)展[J]. 白永琴,楊青川.  生物技術(shù)通報. 2009(09)
[5]植物抗逆蛋白(LEA3)22-氨基酸耐鹽結(jié)構(gòu)域在酵母細(xì)胞中的鑒定[J]. 劉昀,李冉輝,汪為茂,梁翔宇,鄭易之.  植物研究. 2009(01)
[6]大豆PM2蛋白(LEA3)表達(dá)可提高酵母重組子的耐鹽性[J]. 李冉輝,劉昀,鄭易之.  大豆科學(xué). 2007(04)
[7]外源lea3基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿的研究[J]. 王瑛,朱寶成,孫毅,張琳宇,羅建平.  核農(nóng)學(xué)報. 2007(03)
[8]HVA1基因轉(zhuǎn)化番茄及轉(zhuǎn)基因番茄耐鹽性的初步鑒定[J]. 陳火英,莊天明,張曉寧,劉楊,張英,夏聰美.  上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版). 2006(01)
[9]小麥耐逆基因-TaLEA2轉(zhuǎn)化擬南芥的研究[J]. 趙詠梅,楊建雄,俞嘉寧,原江鋒.  西北植物學(xué)報. 2006(01)
[10]用開苞導(dǎo)入法將抗旱耐鹽基因?qū)胗衩鬃越幌档某醪窖芯縖J]. 劉祥久,姜敏,張喜華,楊立國,郭延玲,郝楠.  雜糧作物. 2005(03)

碩士論文
[1]小麥與葉銹菌互作中Wrab17基因的克隆、表達(dá)及功能研究[D]. 楊高山.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號:3131829

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