目的:基質重塑相關基因7（MXRA7）是基質重塑家族的一員,目前已有的研究表明:MXRA7的缺失可以減輕四氯化碳誘導的小鼠急性肝損傷;MXRA7促進骨髓間充質干細胞向成骨細胞分化;MXRA7在銀屑病的發(fā)展中起一個負調控作用等。但是關于MXRA7在白血病的中作用并未有過報道。我們通過公共數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn),與正常人相比,MXRA7在急性早幼粒白血病中表達量異常升高,說明MXRA7可能參與調控急性早幼粒白血病的發(fā)生發(fā)展。因此我們使用了急性早幼粒白血病細胞NB4細胞株來研究MXRA7在急性早幼粒白血病中的作用及相關機制。方法:（1）利用BloodSpot和Leukemia Gene Atlas這兩個與造血和白血病相關的公共數(shù)據(jù)庫來分析MXRA7在急性髓系白血病中的表達情況。（2）收集急性早幼粒白血病病人（APL或AML-M3）、急性B淋巴細胞白血病病人（B-ALL）、急性T淋巴細胞白血病病人（T-ALL）、正常供體的骨髓樣本以及白血病細胞系,應用熒光定量PCR及Western blot檢測MXRA7的表達情況。（3）應用慢病毒系統(tǒng)分別構建MXRA7過表達和敲低的NB4穩(wěn)轉細胞系,應用熒光定量PC... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：數(shù)據(jù)庫分析ＭＸＲＡ７在白血病中表達量的變化??（Ａ－Ｂ）?Ｂｌｏｏｄｓｐｏｔ公共數(shù)據(jù)庫中?

基質重塑相關基因７（ＭＸＲＡ７＞在急性早幼粒白血病發(fā)展中的作用及機制研究?３結果??株急性髓系白血病細胞株（ＮＢ４、ＨＬ－６０、ＴＨＰ－丨、ＳＨＮ１），１株急性Ｔ淋巴細胞??白血病細胞株（Ｍ０ＬＴ－４），２株急性Ｂ淋巴細胞白血病細胞株（６９７、Ｒｅｈ），熒??光定量ＰＣＲ和蛋白免疫印跡實驗驗證ＭＸＲＡ７在ＡＭＬ、Ｂ－ＡＬＬ和Ｔ－ＡＬＬ的細胞??系中的表達量均高于正常供體（圖２－ＩＢ）。??Ａ?Ｂ??８０－Ｉ?２５－１??ｒ?ｆ�。博枺�?ｉ??１１?－?？ｊ?Ｉ?ｒ，?■！??ＭＸＲＡ７?確細秦?????ＭＸＲＡ７?［?＾?＊＊＊??ｇａｐｄｈ?ｍｂｖ?ｍｍｍ?■丨丨丨丨丨ｍｍｍｍ?ｇａｐｄｈ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ??ＮＢＭ?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＡＭＬ－Ｍ３?ＮＢ４?ＨＬ－？０?ＴＨＰ－１?ＳＨＩ－１?ＭＯＬＴ－４?￥９７?Ｒｅｈ??圖２－Ｉ：?ＭＸＲＡ７在正常供體和急性白血病病人骨髓樣本以及各種白血病細胞系??中的表達分析??（Ａ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?實驗檢測?ＭＸＲＡ７?在正常供體、Ｂ－ＡＬＬ、Ｔ－ＡＬＬ?和??ＡＭＬ－Ｍ３?（ＡＰＬ）病人骨硫樣本中的表達量??（Ｂ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?實驗檢測?ＭＸＲＡ７?在?ＡＭＬ?細胞株（ＮＢ４、ＨＬ－６０、??ＴＨＰ－ｌ、ＳＨＩ－ｌ?）、Ｂ－ＡＬＬ?細胞株（６９７、Ｒｅｈ?）和�。粒蹋�?細胞株（Ｍ０ＬＴ－４?）中的??表達量??ＭＸＲＡ７基因在小鼠中位于ＩＩ號染色體上，在人類中位于１７號染色體上。根??據(jù)現(xiàn)有的基因組文庫數(shù)裾，人類的ＭＸＲＡ７基因可能通過可變剪切機制產生三個??

??．?ｉｆ?１Ｍ＇?；■?：?ｌ?ｎｏ．??ｓｉ?Ｉ?２０?－Ｊ－?＊＊?＊?ｉ??￣±￣?？?：?ｉＳ?孫?＂ＯＴ?／?Ｉｓ?ｓｏ?■：?？?＊＊??至Ｊ?？二知象－最ｉ?Ｊ一＿?．：滬每?１?Ｊ二吞？?▲??ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ３?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ３?日－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ２?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ＞ＡＬＬ??ｎ＊１９?ｎ＊１８?ｎ？１７?ｎ＊１６?ｎ＝１６?ｎ＝１７?ｎ＝１７?ｎ＝１４?ｎ＝２０?ｎ＝１８?ｎ＝１７?ｎ＝１６??圖２－２：?ＭＸＲＡ７基因的三個轉錄本在幾種白血病病人骨髓中的表達量??（Ａ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?檢測?ＭＸＲＡ７?ｉｓｏｆｏｍｉ－２８?在正常供體、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓＿樣本中的表達量??（Ｂ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?檢測?ＭＸＲＡ７－ｉｓｆｏｒｍ－２９?在正常供體、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓＿樣本中的表達量??（Ｃ?）ＲＴ－ｑＰＣＲ?實驗檢測?ＭＸＲＡ７－ｉｓｆｏｒｍ－３０?在正常供體、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓樣本中的表達量??３．３?ＭＸＲＡ７過表達和敲低質粒載體構建及ＮＢ４穩(wěn)轉細胞系的構建??為了體外研宄ＭＸＲＡ７基因在急性早幼粒白血病中的作用，我們分別構建了??過表達和敲低ＭＸＲＡ７的慢病毒質粒（圖３－１Ａ），并經過２９３Ｔ細胞包裝獲得可??感染細胞的慢病毒（圖３－ｌ?Ｂ）。??２４??


本文編號：3126665