馬鈴薯蔗糖響應基因StMYB44、StMYB44b的克隆及功能分析
發(fā)布時間:2021-04-01 18:38
MYB轉錄因子存在于所有真核生物中,是最具代表的轉錄因子家族之一,廣泛參與植物發(fā)育、苯丙烷代謝、生物與非生物脅迫響應、激素響應以及細胞形態(tài)建成等過程。本研究以馬鈴薯‘青薯9號’的塊莖為實驗材料,克隆了St MYB44、St MYB44b基因,并對其表達模式進行分析,將構建的表達載體轉化至同屬茄科的模式植物煙草中,分析不同蔗糖濃度下轉基因煙草的生長情況,對St MYB44、St MYB44b基因進行功能初探。主要結果如下:1、以馬鈴薯‘青薯9號’塊莖的c DNA為模板,克隆了St MYB44基因。St MYB44有2種類型,CDS長度為962 bp和953 bp,分別編碼320和317個氨基酸,為不穩(wěn)定的親水性蛋白;亞細胞定位預測發(fā)現(xiàn),St MYB44定位于細胞核;系統(tǒng)進化樹和多序列比對分析發(fā)現(xiàn),St MYB44與番茄MYB44的親緣關系最近,與橡膠樹的親緣關系較遠;啟動子分析發(fā)現(xiàn),St MYB44含有多種調控元件,如光照、激素、脅迫響應等;q RT-PCR分析發(fā)現(xiàn),St MYB44在花中表達最高,匍匐莖中最低;St MYB44在Me JA處理下,表達量先降低后升高,在8 h表達量最低;...
【文章來源】:青海大學青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
馬鈴薯塊莖的RNA
青海大學碩士學位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達分析24圖2.1馬鈴薯塊莖的RNAM:DL2000;1-2為塊莖RNAFig.2.1RNAofPotatoTuberM:DL2000;1-2asTuberRNA2)CDS的克隆以馬鈴薯‘青薯9號’塊莖的cDNA為模板,進行特異性擴增,產(chǎn)物經(jīng)2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測其片段的大小,結果如圖2.2所示,獲得一條約1000bp的條帶,與預期的StMYB44片段大小基本一致。將條帶切下,經(jīng)過回收、連接、轉化、篩菌并送生工測序后,將測序結果與NCBI中的原基因序列使用DNAMAN進行比較發(fā)現(xiàn),StMYB44存在2種類型,分別命名為StMYB44-1和StMYB44-2。圖2.2StMYB44基因的CDS克隆M:DL2000;1:StMYB44
青海大學碩士學位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達分析25Fig2.2StMYB44geneCDScloningM:DL2000;1:StMYB442.4.1.2馬鈴薯StMYB44的生物信息學分析1)馬鈴薯StMYB44基因的序列分析如圖2.3所示,StMYB44-1與原序列(XM_006367359.2)一樣,CDS長度為962bp,編碼的蛋白質含有320個氨基酸,而StMYB44-2發(fā)生了11處堿基改變和9處堿基缺失,CDS長度為953bp,編碼的蛋白質含有317個氨基酸。StMYB44-1和StMYB44-2均含有兩個保守的MYB結構域,為典型的R2R3-MYB轉錄因子。圖2.3-1StMYB44基因的序列比對圖Fig2.3-1SequencealignmentofStMYB44gene
【參考文獻】:
期刊論文
[1]七種彩色馬鈴薯的蛋白質營養(yǎng)評價[J]. 徐麗珊,戴一輝,謝子玉,蒲首丞,程林潤. 浙江師范大學學報(自然科學版). 2020(01)
[2]利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選花生AhMYB44互作蛋白[J]. 劉永惠,沈一,沈悅,陳志德. 植物遺傳資源學報. 2020(01)
[3]ABA合成基因StNCED2對馬鈴薯塊莖形成的影響[J]. 朱文姣,劉璐,章甲,陳敏,徐玉偉,楊清. 南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2019(05)
[4]青海馬鈴薯生產(chǎn)的比較優(yōu)勢分析[J]. 蘇旺,周云,王艦. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2019(09)
[5]烯效唑(S3307)和胺鮮酯(DTA-6)對馬鈴薯葉與塊莖糖代謝及產(chǎn)量的影響[J]. 齊德強,趙晶晶,馮乃杰,鄭殿峰,梁曉艷. 作物雜志. 2019(04)
[6]紫色馬鈴薯花青素StAN1基因的克隆及功能分析[J]. 賈羊毛加,王芳,葉廣繼,王艦. 西北植物學報. 2019(03)
[7]CaMV35S啟動子及其在轉基因作物中的應用和檢測[J]. 湯婷,謝實龍,祝旋,徐俊鋒,唐俊,汪小福. 浙江農(nóng)業(yè)學報. 2019(01)
[8]馬鈴薯淀粉合成與降解研究進展[J]. 何虎翼,唐洲萍,楊鑫,樊吳靜,譚冠寧,李麗淑,何新民. 生物技術通報. 2019(04)
[9]馬鈴薯淀粉物化特性分析及其對馬鈴薯熱干面品質影響[J]. 蔡沙,施建斌,隋勇,何建軍,陳學玲,范傳會,蔡芳,梅新. 現(xiàn)代食品科技. 2019(01)
[10]果實蔗糖轉運蛋白研究進展[J]. 李馨玥,王愛德. 北方果樹. 2018(05)
博士論文
[1]棉花GhMYB44, GhAP2和GhARC基因功能鑒定及CRISPR/Cas9全基因組脫靶分析[D]. HAKIM.華中農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]蔗糖及茉莉酸信號在草莓果實發(fā)育中的作用及其機理分析[D]. 賈海鋒.中國農(nóng)業(yè)大學 2013
[3]植物黃酮類化合物槲皮素與轉錄因子AtMYB44誘導和調控植物防衛(wèi)反應的研究[D]. 賈振華.南京農(nóng)業(yè)大學 2010
碩士論文
[1]蔗糖誘導馬鈴薯(S.tuberosum L.)試管薯形成的轉錄組分析與關鍵基因篩選[D]. 高小溪.華中農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]棕色棉色素相關MYB轉錄因子基因的克隆及功能研究[D]. 張小萌.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
[3]蔗糖誘導CmFTL2調控夏菊開花的分子機理研究[D]. 王恒.南京農(nóng)業(yè)大學 2017
[4]火龍果CAT基因在煙草中的遺傳轉化及功能分析[D]. 葛菲.貴州大學 2016
[5]StPP2C和StABF對馬鈴薯塊莖形成的影響[D]. 葉暉.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[6]茉莉酸信號參與的馬鈴薯離體塊莖發(fā)育調控[D]. 李輝軍.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2013
[7]轉錄因子AtMYB44促進擬南芥抗病耐熱及抑制開花的作用[D]. 田雙梅.南京農(nóng)業(yè)大學 2012
[8]蔗糖誘導馬鈴薯塊莖形成的信號分子功能研究[D]. 楊彩菊.云南師范大學 2006
本文編號:3113799
【文章來源】:青海大學青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
馬鈴薯塊莖的RNA
青海大學碩士學位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達分析24圖2.1馬鈴薯塊莖的RNAM:DL2000;1-2為塊莖RNAFig.2.1RNAofPotatoTuberM:DL2000;1-2asTuberRNA2)CDS的克隆以馬鈴薯‘青薯9號’塊莖的cDNA為模板,進行特異性擴增,產(chǎn)物經(jīng)2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測其片段的大小,結果如圖2.2所示,獲得一條約1000bp的條帶,與預期的StMYB44片段大小基本一致。將條帶切下,經(jīng)過回收、連接、轉化、篩菌并送生工測序后,將測序結果與NCBI中的原基因序列使用DNAMAN進行比較發(fā)現(xiàn),StMYB44存在2種類型,分別命名為StMYB44-1和StMYB44-2。圖2.2StMYB44基因的CDS克隆M:DL2000;1:StMYB44
青海大學碩士學位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達分析25Fig2.2StMYB44geneCDScloningM:DL2000;1:StMYB442.4.1.2馬鈴薯StMYB44的生物信息學分析1)馬鈴薯StMYB44基因的序列分析如圖2.3所示,StMYB44-1與原序列(XM_006367359.2)一樣,CDS長度為962bp,編碼的蛋白質含有320個氨基酸,而StMYB44-2發(fā)生了11處堿基改變和9處堿基缺失,CDS長度為953bp,編碼的蛋白質含有317個氨基酸。StMYB44-1和StMYB44-2均含有兩個保守的MYB結構域,為典型的R2R3-MYB轉錄因子。圖2.3-1StMYB44基因的序列比對圖Fig2.3-1SequencealignmentofStMYB44gene
【參考文獻】:
期刊論文
[1]七種彩色馬鈴薯的蛋白質營養(yǎng)評價[J]. 徐麗珊,戴一輝,謝子玉,蒲首丞,程林潤. 浙江師范大學學報(自然科學版). 2020(01)
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[4]青海馬鈴薯生產(chǎn)的比較優(yōu)勢分析[J]. 蘇旺,周云,王艦. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2019(09)
[5]烯效唑(S3307)和胺鮮酯(DTA-6)對馬鈴薯葉與塊莖糖代謝及產(chǎn)量的影響[J]. 齊德強,趙晶晶,馮乃杰,鄭殿峰,梁曉艷. 作物雜志. 2019(04)
[6]紫色馬鈴薯花青素StAN1基因的克隆及功能分析[J]. 賈羊毛加,王芳,葉廣繼,王艦. 西北植物學報. 2019(03)
[7]CaMV35S啟動子及其在轉基因作物中的應用和檢測[J]. 湯婷,謝實龍,祝旋,徐俊鋒,唐俊,汪小福. 浙江農(nóng)業(yè)學報. 2019(01)
[8]馬鈴薯淀粉合成與降解研究進展[J]. 何虎翼,唐洲萍,楊鑫,樊吳靜,譚冠寧,李麗淑,何新民. 生物技術通報. 2019(04)
[9]馬鈴薯淀粉物化特性分析及其對馬鈴薯熱干面品質影響[J]. 蔡沙,施建斌,隋勇,何建軍,陳學玲,范傳會,蔡芳,梅新. 現(xiàn)代食品科技. 2019(01)
[10]果實蔗糖轉運蛋白研究進展[J]. 李馨玥,王愛德. 北方果樹. 2018(05)
博士論文
[1]棉花GhMYB44, GhAP2和GhARC基因功能鑒定及CRISPR/Cas9全基因組脫靶分析[D]. HAKIM.華中農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]蔗糖及茉莉酸信號在草莓果實發(fā)育中的作用及其機理分析[D]. 賈海鋒.中國農(nóng)業(yè)大學 2013
[3]植物黃酮類化合物槲皮素與轉錄因子AtMYB44誘導和調控植物防衛(wèi)反應的研究[D]. 賈振華.南京農(nóng)業(yè)大學 2010
碩士論文
[1]蔗糖誘導馬鈴薯(S.tuberosum L.)試管薯形成的轉錄組分析與關鍵基因篩選[D]. 高小溪.華中農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]棕色棉色素相關MYB轉錄因子基因的克隆及功能研究[D]. 張小萌.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
[3]蔗糖誘導CmFTL2調控夏菊開花的分子機理研究[D]. 王恒.南京農(nóng)業(yè)大學 2017
[4]火龍果CAT基因在煙草中的遺傳轉化及功能分析[D]. 葛菲.貴州大學 2016
[5]StPP2C和StABF對馬鈴薯塊莖形成的影響[D]. 葉暉.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[6]茉莉酸信號參與的馬鈴薯離體塊莖發(fā)育調控[D]. 李輝軍.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2013
[7]轉錄因子AtMYB44促進擬南芥抗病耐熱及抑制開花的作用[D]. 田雙梅.南京農(nóng)業(yè)大學 2012
[8]蔗糖誘導馬鈴薯塊莖形成的信號分子功能研究[D]. 楊彩菊.云南師范大學 2006
本文編號:3113799
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