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辣椒疫病抗性相關(guān)基因CaAP2/ERF的功能鑒定及調(diào)控機理研究

發(fā)布時間:2021-03-25 14:39
  辣椒是一種重要的蔬菜作物,而疫病嚴(yán)重危害辣椒的產(chǎn)收,因此挖掘疫病抗性基因?qū)τ诶苯返目挂卟∮N有重要意義。ERF基因在植物應(yīng)對病原菌侵染的抗性反應(yīng)中有重要作用,因此本研究首先對辣椒AP2/ERF基因家族成員進行鑒定,研究了辣椒CaAP2/ERF基因的組織表達特性及其在不同生物脅迫下的表達特征,并對其啟動子中的順式作用元件進行預(yù)測與分析,接著利用VIGS技術(shù)將CaAP2/ERF基因沉默后進行抗病性鑒定與篩選,最后利用煙草瞬時表達、酵母單雜交與煙草的遺傳轉(zhuǎn)化等技術(shù)對辣椒CaAP2/ERF064、CaAP2/ERF109與CaAP2/ERF049基因在植物抗疫病反應(yīng)中的功能及其與辣椒PR基因CaBPR1之間的調(diào)控關(guān)系進行研究解析,主要結(jié)果如下:1.辣椒基因組中包含175個AP2/ERF基因。亞細胞定位結(jié)果表明CaAP2/ERF127蛋白定位于細胞核,而CaAP2/ERF129與CaAP2/ERF171蛋白質(zhì)則分布在細胞質(zhì)與細胞核中。組織表達特性分析表明CaAP2/ERF基因在根與果實中有較高的表達水平。不同CaAP2/ERF基因在病菌的侵染與植物激素的處理過程中均具有特異的表達特征。啟動子元件... 

【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:135 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

辣椒疫病抗性相關(guān)基因CaAP2/ERF的功能鑒定及調(diào)控機理研究


辣椒疫霉菌與寄主的互作模型(Lamouretal.2012)

模型圖,防御反應(yīng),模型圖,病原物


物體進化出復(fù)雜的防御調(diào)控網(wǎng)絡(luò)以應(yīng)對不同病原物的入侵(圖 1-2)。植物的御反應(yīng)就是依靠細胞膜表面模式識別受體(Pattern Recognition Receptors,P,這些受體相關(guān)激酶(Receptor-like kinase,RLK)通常含有一個跨膜的結(jié)構(gòu)細胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域,它可以通過檢測病原物的保守分子特征識別病原物進而 的 抗 病 反 應(yīng) 以 抵 御 病 原 菌 的 入 侵 , 這 被 稱 為 病 原 物 激 發(fā) 的 免 疫MP-Triggered Immunity,PTI),也就是植物的基礎(chǔ)免疫反應(yīng)。植物的 PTI 反助植物抵御自然界中的多數(shù)病原物的侵染。此外,還有一些病原菌在入侵植寄主細胞中分泌一些效應(yīng)因子以擾亂其基礎(chǔ)免疫反應(yīng),以保證對寄主的侵襲增殖。而植物則進化出相應(yīng)抗性基因,即 R 基因,R 基因可以通過識別病原無毒基因(Avr),進而在寄主體內(nèi)產(chǎn)生特異的免疫反應(yīng),這也被稱為效應(yīng)因免疫反應(yīng)(Effector-Triggered Immunity,ETI)(Li et al. 2015; Yu et al. 2017)。與,植物的 ETI 反應(yīng)通常更快更強烈,會促使病程相關(guān)蛋白(pathogenesis rein,PR)大量產(chǎn)生,并在病原菌侵染部位產(chǎn)生過敏性壞死反應(yīng)(Hypersenponse,HR)以限制病原菌在寄主體內(nèi)的擴散。

乙烯,突變體,不敏感,模式識別受體


體激素乙烯(ET)是植物在遭受病原物侵染時產(chǎn)生的主要成分疫反應(yīng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用(Broekaert et al. 2006; van Loond Baldwin 2007)。當(dāng)植物通過細胞膜上的模式識別受體 PRR 識,會激活寄主體內(nèi)的 MAPK 信號途徑,乙烯迅速合成,進而導(dǎo)(Mersmann et al. 2010; Broekgaarden et al. 2015)。在擬南芥中乙增強 SA 標(biāo)記基因 PR1 的表達(De Vos et al. 2006)。Verberne et a突變體證明乙烯是煙草植株的系統(tǒng)信號分子,并且可以提高植強防御基因的轉(zhuǎn)錄。Hoffman et al. (1999)利用大豆的乙烯不敏感降低乙烯敏感性可以增強大豆植株對 Pseudomonas syringae pa sojae 病菌的抗性,但會減弱對 Septoria glycines 與 Rhizoctonon-Reyes et al. (2009)發(fā)現(xiàn)乙烯可以增強 SA 途徑 NPR1 基因的轉(zhuǎn) 基因在植物的防御信號網(wǎng)絡(luò)中有重要的作用。此外,Shi et a同乙烯不敏感突變體 etr1-1、ein4-1、ein2-5、ein3-1、ein3 與 強的耐受性,而組成型乙烯信號表達突變體 ctr1-1 與 EIN3 基因顯著降低。

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]番茄抗病蛋白Sw-5b自抑制與激活的調(diào)控機理及亞細胞定位研究[D]. 陳小姣.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]辣椒及其嫁接苗對疫霉菌的防御響應(yīng)與CaRGA2基因功能分析[D]. 張瑩麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013

碩士論文
[1]轉(zhuǎn)幾丁質(zhì)酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因玉米抗紋枯病研究[D]. 黃玨.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號:3099851

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