黑穗醋栗類黃酮-3’,5’-羥化酶基因的克隆及表達特性研究
發(fā)布時間：2021-03-18 19:37
黑穗醋栗（Ribes nigrum L.）是寒地特色小漿果果樹樹種之一,果實中花色苷含量較高,花色苷具有改善視力、降低血壓、減緩炎癥、抑制癌細胞等多種保健功能。類黃酮-3’,5’-羥基化酶（F3’5’H）是花色苷合成途徑中的關鍵酶之一,對花翠素（是花色苷的一種）的合成起著至關重要的作用。本論文以東北農(nóng)業(yè)大學園藝試驗站黑穗醋栗種植資源圃中的‘布勞德’（Brodforp）為試驗材料,在克隆的基礎上,實施實時熒光定量PCR技術,分析了黑穗醋栗F3’5’H基因在根、莖、葉、花、芽等不同組織器官以及果實發(fā)育的不同時期的表達特性,推測該基因的表達與果中花色苷含量的相關關系,構建了F3’5’H原核表達系統(tǒng),以期為系統(tǒng)的闡明F3’5’H基因在黑穗醋栗花色苷生物合成中的作用以及表達方式提供理論依據(jù)。主要研究結果如下:（1）采用PCR技術成功克隆得到黑穗醋栗類黃酮-3’5’-羥化酶（F3’5’H）基因,開放閱讀框（ORF）的長度為1530 bp,編碼509個氨基酸。采用生物信息學方法預測黑穗醋栗F3’5’H基因編碼的蛋白質(zhì)相對分子量為57.11 kDa,理論等電點為9.26,為親水性蛋白,無信號肽,有1個...
【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
研究技術路線
黑穗醋栗總RNA瓊脂糖凝膠電泳結果
80 值為 2.03，OD 260/OD 230 值為 2.24提取黑穗醋栗的 RNA 符合后續(xù)分子生物1 黑穗醋栗總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳結果l RNA electrophoresis patterns of Ribes n 基因的克隆登錄的黑穗醋栗 F3'5'H 基因信息，獲得 引物：F1，F(xiàn)2。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]ABA和GA3對黑穗醋栗二次萌芽超微結構的影響[J]. 秦棟,張椿浩,劉慶帥,薛曉曉,霍俊偉,員盎然. 果樹學報. 2017(10)
[2]日本蛇根草黃酮醇合成酶基因的克隆及其序列分析[J]. 張宇斌,彭貴,潘蓉蓉,陳婷,申歡,余遠珍,孫威. 基因組學與應用生物學. 2018(07)
[3]細胞色素P450酶的表觀遺傳學調(diào)控及研究進展[J]. 張軼雯,方羅,鄭小衛(wèi),李清林,童瑩慧,鮑美華,黃萍. 中國現(xiàn)代應用藥學. 2017(02)
[4]‘桂葡6號’葡萄花色苷組成特點與基因表達規(guī)律解析[J]. 成果,周思泓,黃羽,張瑛,管敬喜,楊瑩,文仁德,張勁. 植物生理學報. 2017(01)
[5]煙草FLS基因表達抑制對類黃酮代謝的影響[J]. 宋中邦,李文正,高玉龍,王丙武,師君麗,余玉珍,陳麗梅,李永平. 基因組學與應用生物學. 2016(12)
[6]黑穗醋栗果實多糖的制備、結構鑒定及生物活性研究[J]. 徐雅琴,王躍鵬,牛小杰,倪耀成,王麗波,楊昱,周濤. 食品科學. 2017(15)
[7]芍藥查爾酮異構酶基因（CHI）克隆、密碼子偏好性分析以及蛋白結構功能預測[J]. 吳彥慶,趙大球,王靜,陶俊. 華北農(nóng)學報. 2016(02)
[8]藥用植物中細胞色素P450基因的研究進展[J]. 董栩,許燕,李月亭,趙爽. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2016(03)
[9]石榴果肉PgF3′5′H基因克隆及不同溫度處理下的表達分析[J]. 關曉彎,陳磊,涂佳麗,張水明. 西北植物學報. 2016(03)
[10]黃草烏Av-F3’5’H基因的克隆與表達分析[J]. 馬璐琳,王祥寧,賈文杰,段青,崔光芬,杜文文,王繼華. 西南農(nóng)業(yè)學報. 2015(06)
博士論文
[1]荔枝果皮花色素苷生物合成關鍵調(diào)控因子的篩選及其功能驗證[D]. 賴彪.華南農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]微環(huán)境調(diào)控‘赤霞珠’葡萄果實花色苷代謝的研究[D]. 成果.西北農(nóng)林科技大學 2015
[3]山葡萄花色苷生物合成相關結構基因克隆與表達[D]. 劉海峰.東北林業(yè)大學 2010
[4]藍色花形成關鍵基因的分離及其表達分析[D]. 孟麗.北京林業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]黑穗醋栗酚類物質(zhì)的分析[D]. 趙劍輝.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]不同溫度貯藏對采后石榴品質(zhì)的影響及相關基因的表達[D]. 關曉彎.安徽農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]茶樹類黃酮-3’,5’-羥基化酶的功能分析[D]. 許玉嬌.安徽農(nóng)業(yè)大學 2014
[4]花穗整穗和套袋對葡萄花色苷組分及合成相關基因表達的影響[D]. 張雷.南京農(nóng)業(yè)大學 2014
本文編號：3088823
【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
研究技術路線
黑穗醋栗總RNA瓊脂糖凝膠電泳結果
80 值為 2.03，OD 260/OD 230 值為 2.24提取黑穗醋栗的 RNA 符合后續(xù)分子生物1 黑穗醋栗總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳結果l RNA electrophoresis patterns of Ribes n 基因的克隆登錄的黑穗醋栗 F3'5'H 基因信息，獲得 引物：F1，F(xiàn)2。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]ABA和GA3對黑穗醋栗二次萌芽超微結構的影響[J]. 秦棟,張椿浩,劉慶帥,薛曉曉,霍俊偉,員盎然. 果樹學報. 2017(10)
[2]日本蛇根草黃酮醇合成酶基因的克隆及其序列分析[J]. 張宇斌,彭貴,潘蓉蓉,陳婷,申歡,余遠珍,孫威. 基因組學與應用生物學. 2018(07)
[3]細胞色素P450酶的表觀遺傳學調(diào)控及研究進展[J]. 張軼雯,方羅,鄭小衛(wèi),李清林,童瑩慧,鮑美華,黃萍. 中國現(xiàn)代應用藥學. 2017(02)
[4]‘桂葡6號’葡萄花色苷組成特點與基因表達規(guī)律解析[J]. 成果,周思泓,黃羽,張瑛,管敬喜,楊瑩,文仁德,張勁. 植物生理學報. 2017(01)
[5]煙草FLS基因表達抑制對類黃酮代謝的影響[J]. 宋中邦,李文正,高玉龍,王丙武,師君麗,余玉珍,陳麗梅,李永平. 基因組學與應用生物學. 2016(12)
[6]黑穗醋栗果實多糖的制備、結構鑒定及生物活性研究[J]. 徐雅琴,王躍鵬,牛小杰,倪耀成,王麗波,楊昱,周濤. 食品科學. 2017(15)
[7]芍藥查爾酮異構酶基因（CHI）克隆、密碼子偏好性分析以及蛋白結構功能預測[J]. 吳彥慶,趙大球,王靜,陶俊. 華北農(nóng)學報. 2016(02)
[8]藥用植物中細胞色素P450基因的研究進展[J]. 董栩,許燕,李月亭,趙爽. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2016(03)
[9]石榴果肉PgF3′5′H基因克隆及不同溫度處理下的表達分析[J]. 關曉彎,陳磊,涂佳麗,張水明. 西北植物學報. 2016(03)
[10]黃草烏Av-F3’5’H基因的克隆與表達分析[J]. 馬璐琳,王祥寧,賈文杰,段青,崔光芬,杜文文,王繼華. 西南農(nóng)業(yè)學報. 2015(06)
博士論文
[1]荔枝果皮花色素苷生物合成關鍵調(diào)控因子的篩選及其功能驗證[D]. 賴彪.華南農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]微環(huán)境調(diào)控‘赤霞珠’葡萄果實花色苷代謝的研究[D]. 成果.西北農(nóng)林科技大學 2015
[3]山葡萄花色苷生物合成相關結構基因克隆與表達[D]. 劉海峰.東北林業(yè)大學 2010
[4]藍色花形成關鍵基因的分離及其表達分析[D]. 孟麗.北京林業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]黑穗醋栗酚類物質(zhì)的分析[D]. 趙劍輝.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]不同溫度貯藏對采后石榴品質(zhì)的影響及相關基因的表達[D]. 關曉彎.安徽農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]茶樹類黃酮-3’,5’-羥基化酶的功能分析[D]. 許玉嬌.安徽農(nóng)業(yè)大學 2014
[4]花穗整穗和套袋對葡萄花色苷組分及合成相關基因表達的影響[D]. 張雷.南京農(nóng)業(yè)大學 2014
本文編號：3088823
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