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miR-129-5p靶向LARP1基因調(diào)控肺癌細(xì)胞順鉑耐藥

發(fā)布時(shí)間:2021-03-04 13:58
  目的探討miR-129-5p能否通過(guò)調(diào)控La相關(guān)蛋白1(LARP1)表達(dá),從而調(diào)節(jié)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑(DDP)的敏感性。方法通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白質(zhì)印記(Western blot)檢測(cè)肺癌細(xì)胞A549和肺癌順鉑耐藥細(xì)胞A549/DDP中miR-129-5p、LARP1以及多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)的表達(dá)水平。將A549/DDP分為對(duì)照組(NC)、miR-con組、miR-129-5p組、si-con組和si-LARP1組、miR-129-5p+pcDNA-con組、miR-129-5p+pcDNA-LARP1組。細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)檢測(cè)細(xì)胞存活率和對(duì)順鉑的半數(shù)抑制濃度(IC50)。Western blot檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白D1(CyclinD1)和MRP1蛋白表達(dá)。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)和Western blot檢測(cè)驗(yàn)證miR-129-5p和LARP1的靶向調(diào)控關(guān)系。結(jié)果與A549細(xì)胞相比,A549/DDP細(xì)胞中miR-129-5p的表達(dá)水平降低,LARP1和MRP1的表達(dá)水平升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與miR-con組比較,miR-... 

【文章來(lái)源】:西部醫(yī)學(xué). 2020,32(09)

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【部分圖文】:

miR-129-5p靶向LARP1基因調(diào)控肺癌細(xì)胞順鉑耐藥


Western Blot檢測(cè)LARP1、CyclinD1、MRP1蛋白的表達(dá)

蛋白,過(guò)表達(dá),細(xì)胞,敏感性


與A549細(xì)胞比較,A549/DDP細(xì)胞中miR-129-5p的表達(dá)水平顯著降低,LARP1 mRNA和LARP1蛋白、MRP1 mRNA和MRP1蛋白的表達(dá)水平顯著升高(P <0.05),見(jiàn)表1、圖1。2.2 過(guò)表達(dá)miR-129-5p抑制A549/DDP增殖,提高其對(duì)順鉑的敏感性

蛋白,細(xì)胞,細(xì)胞存活率,細(xì)胞株


與NC組和si-con組比較,si-LARP1組A549/DDP細(xì)胞LARP1的表達(dá)水平顯著降低(P<0.05),表明沉默LARP1的A549/DDP細(xì)胞株構(gòu)建成功。與NC組和si-con組比較,si-LARP1組A549/DDP細(xì)胞CyclinD1和MRP1蛋白的表達(dá)水平顯著降低,細(xì)胞存活率顯著降低,細(xì)胞對(duì)順鉑的IC50顯著降低(P均 <0.05)。見(jiàn)表3、圖3。圖3 Western Blot檢測(cè)LARP1、CyclinD1和MRP1蛋白的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3063337

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