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小麥胚發(fā)育過(guò)程特征特性及再生相關(guān)基因TaDCC1-2B的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-03-02 15:42
  現(xiàn)階段小麥再生效率低,遺傳轉(zhuǎn)化相對(duì)困難,已經(jīng)成為制約小麥功能基因組研究的主要障礙之一。高效的組織培養(yǎng)再生體系對(duì)于推進(jìn)基因工程改良小麥品種具有重要意義。小麥再生能力與基因型密切相關(guān)。為了探究小麥胚發(fā)育過(guò)程中的部分理化指標(biāo)和顯微結(jié)構(gòu)差異,以不同小麥基因型為材料,測(cè)定了花后16天和30天小麥胚中的糖類(葡萄糖、蔗糖)、激素(細(xì)胞分裂素、赤霉素)和活性氧(過(guò)氧化氫、超氧陰離子)的含量,并對(duì)胚內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。同時(shí)克隆一個(gè)與小麥再生相關(guān)的硫氧還蛋白基因TaDCC1-2B,對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將TaDCC1-2B基因轉(zhuǎn)入擬南芥硫氧還蛋白突變體dcc1進(jìn)行功能分析,取得以下主要研究結(jié)果:1.測(cè)定不同胚性愈傷率的小麥花后16天和30天小麥胚中的糖類、激素和活性氧的含量,結(jié)果顯示較高胚性愈傷率基因型小麥花后30天麥胚的赤霉素含量顯著大于低胚性愈傷率型,而花后16天赤霉素含量無(wú)顯著差異,其他生化指標(biāo)在不同發(fā)育階段同一時(shí)期差異不顯著。推測(cè)小麥胚發(fā)育晚期的赤霉素含量與胚性愈傷率具有一定的相關(guān)性。在對(duì)胚內(nèi)部結(jié)構(gòu)觀察中,并未發(fā)現(xiàn)在兩個(gè)發(fā)育階段同一時(shí)期不同小麥胚之間存在明顯差異。2.克隆獲得的... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

小麥胚發(fā)育過(guò)程特征特性及再生相關(guān)基因TaDCC1-2B的克隆與功能分析


中國(guó)小麥面積、單產(chǎn)和總產(chǎn)變化趨勢(shì)(1949-2016)(何中虎等2018)

硫氧還蛋白,二硫鍵,反應(yīng)機(jī)理


1.2.3 硫氧還蛋白的分類分布Trx 由多基因編碼,分布在不同種類生物、不同類細(xì)胞乃至同類細(xì)胞不同位置的Trx,其種類都會(huì)產(chǎn)生一定差異性(王全富等 2015)。植物體內(nèi)經(jīng)典的硫氧還蛋白根據(jù)一級(jí)結(jié)構(gòu)可分為 6 個(gè)類型:f、m、x、y、h 和 o,包含有 WCGPC 或者 WCPPC 基序。其中 f、m、x 和 y 型主要位于葉綠體中,o 型位于線粒體中,h 型主要分布在細(xì) 胞 質(zhì) 中 。 此 外 APS REDUCTASE 1 (APR1) 、 HIGH CHLOROPHYLLFLUORESCENCE 164 (HCF164)含有 WCPFC、HCGPC 和 WCEVC 基序,屬于非經(jīng)典Trx(Gelhaye et al. 2004; Gelhaye et al. 2005; Meyer et al. 2005)。1.2.4 植物中的兩個(gè)硫氧還蛋白系統(tǒng)根據(jù)電子供體和還原酶的不同,植物中可分為三個(gè)硫氧還蛋白系統(tǒng),一個(gè)是以NADPH 為供氫體,由 Trx、還原型輔酶Ⅱ(NADPH)及硫氧還蛋白還原酶(thioredoxinreductase, TrxR)組成的依賴于 NADPH 的硫氧還蛋白系統(tǒng),該系統(tǒng)存在于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中(馬展等 2015),另外一個(gè)是由 Trx、鐵氧還蛋白(ferredoxin, Fd)和硫氧圖 1-2 硫氧還蛋白還原二硫鍵的反應(yīng)機(jī)理 (Jacquot et al. 2002)Fig.1-2 Reaction mechanism of disulfide reduction by thioredoxin (Jacquot et al. 2002)

小麥胚,細(xì)胞分裂素,蔗糖含量,葡萄糖含量


圖 2-1 不同基因型小麥開(kāi)花后 16 d 和 30 d 小麥胚的葡萄糖、蔗糖含量Fig.2-1 Contents of glucose and sucrose in wheat embryos at 16 and 30 days after anthesis of wheat withdifferent genotypes注:1.小寫字母不同表示差異達(dá)到顯著水平(P < 0.05);2.橫坐標(biāo)數(shù)字代表小麥基因型。下同。Note: 1.Different small letters indicate significant different (P < 0.05). 2. The Abscissa number represents the wheatgenotypes. The same as below.由圖 2-1 統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)不同基因型小麥開(kāi)花后 16 天和 30 天小麥胚的葡萄糖含量平均值分別為 4.65 mg/g 和 2.33 mg/g,變異系數(shù)為 15.83%和 30.75%,相應(yīng)同時(shí)期蔗糖含量平均值分別為 25.66 mg/g 和 40.23 mg/g,變異系數(shù)為 13.45%和 23.76%。所有基因型小麥胚內(nèi)葡萄糖含量隨著胚的發(fā)育而降低,而蔗糖則隨之增加,但不同胚性愈傷率小麥胚葡萄糖和蔗糖含量差異不顯著。2.2.2 不同基因型小麥胚發(fā)育過(guò)程中內(nèi)源細(xì)胞分裂素和赤霉素含量分析


本文編號(hào):3059518

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