水稻是全世界最主要糧食作物之一,提供全球近60%人口的食物消費(fèi),而稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）引起的水稻稻瘟病是水稻最嚴(yán)重的病害之一,嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量。研究稻瘟病抗性基因,進(jìn)行抗病育種是目前防治稻瘟病最經(jīng)濟(jì)有效的方法。由于稻瘟病菌的變異和多樣性,抗性品種在種植幾年后往往會失去對稻瘟病的抗性,因此挖掘新的抗性基因十分重要。稻瘟病新抗性基因Pi-ta²來源于水稻品種PiNo.4,初步定位于水稻第12號染色體著絲粒區(qū)域,前期已經(jīng)通過Pi-ta²的物理圖譜得到了候選基因,構(gòu)建了候選基因的功能互補(bǔ)載體和CRISPR敲除載體,并獲得了3個候選基因互補(bǔ)的陽性苗。本研究主要是篩選Pi-ta²的候選基因并對其功能進(jìn)行初步分析,主要內(nèi)容如下:（1）對另外2個候選基因（Pita²-Seq5、Pita²-Seq8）互補(bǔ)載體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行陽性鑒定,從而獲得轉(zhuǎn)基因陽性苗,Pita²-Seq5已獲得2株轉(zhuǎn)基因陽性苗,Pita²

【文章來源】：中南民族大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 稻瘟病抗性基因的研究意義
    1.2 稻瘟病抗性基因的研究進(jìn)展
2研究相關(guān)進(jìn)展">    1.3 Pi-ta²研究相關(guān)進(jìn)展
    1.4 植物抗病分子機(jī)制研究進(jìn)展
    1.5 本研究的目的及意義
2候選基因互補(bǔ)載體遺傳轉(zhuǎn)化及抗病分析">第二章 Pi-ta²候選基因互補(bǔ)載體遺傳轉(zhuǎn)化及抗病分析
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要試劑與配方
    2.3 實(shí)驗(yàn)方案
2候選基因互補(bǔ)載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化">        2.3.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)Pi-ta²候選基因互補(bǔ)載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
0、T₁ 代植株的陽性鑒定">        2.3.2 轉(zhuǎn)基因T₀、T₁ 代植株的陽性鑒定
2候選基因的抗病及表達(dá)分析">        2.3.3 Pi-ta²候選基因的抗病及表達(dá)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.4.1 農(nóng)桿菌菌株P(guān)CR鑒定
2候選基因的水稻遺傳轉(zhuǎn)化">        2.4.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)Pi-ta²候選基因的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
0 代植株的陽性鑒定">        2.4.3 轉(zhuǎn)基因T₀ 代植株的陽性鑒定
1、T₂ 代植株的陽性鑒定">        2.4.4 轉(zhuǎn)基因T₁、T₂ 代植株的陽性鑒定
        2.4.5 離體接種抗病情況
        2.4.6 RNA逆轉(zhuǎn)錄與c DNA檢測
        2.4.7 接種稻瘟病菌前后相關(guān)防御基因的表達(dá)量檢測
    2.5 討論
2候選基因CRISPR載體遺傳轉(zhuǎn)化及抗病分析">第三章 Pi-ta²候選基因CRISPR載體遺傳轉(zhuǎn)化及抗病分析
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 主要試劑與儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方案
2候選基因敲除載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化">        3.3.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)Pi-ta²候選基因敲除載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
0 代植株的陽性鑒定">        3.3.2 轉(zhuǎn)基因T₀ 代植株的陽性鑒定
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.4.1 農(nóng)桿菌菌株P(guān)CR鑒定
2候選基因敲除載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化">        3.4.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)Pi-ta²候選基因敲除載體的水稻遺傳轉(zhuǎn)化
0 代植株的陽性鑒定">        3.4.3 轉(zhuǎn)基因T₀ 代植株的陽性鑒定
2候選基因編輯檢測">        3.4.4 轉(zhuǎn)基因苗中Pi-ta²候選基因編輯檢測
    3.5 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
參與的學(xué)術(shù)會議


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3023847