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水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析

發(fā)布時間:2021-01-30 13:05
  鹽脅迫是抑制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫之一。目前,全球約20%的耕地和近一半的灌溉土地受到鹽漬化的影響,土壤鹽漬化面積達9.0× 108 hm2,這對全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力和可持續(xù)性構(gòu)成嚴重威脅。水稻是中國乃至整個世界的主要糧食作物之一,中國超過一半的人口以水稻為主食。水稻作為一種對鹽脅迫中度敏感作物,鹽脅迫條件下將嚴重影響其產(chǎn)量,這嚴重威脅到人類糧食的安全問題。因此,研究水稻耐鹽機理,為培育耐鹽水稻優(yōu)良品種提供理論依據(jù),以期解決日益嚴重的糧食問題就顯得尤為重要。ABC(ATP-binding cassette proteins,ABC)轉(zhuǎn)運蛋白是已知的最大蛋白超家族之一,存在于所有的生物體中。植物ABC轉(zhuǎn)運蛋白不僅參與植物體內(nèi)脂質(zhì)、激素、金屬離子、次生代謝物和外源物質(zhì)的運輸,并且還參與植物與病原體間的相互作用和植物體內(nèi)離子通道調(diào)控等重要的生理過程的進行,是一類重要的跨膜運輸?shù)鞍准易濉BCC蛋白為ABC轉(zhuǎn)運蛋白超家族中的一個亞家族,又稱多藥耐藥相關(guān)蛋白(Multidrugresistance-associatedprotein,MRP)亞家族,主要參與各種分子從細胞質(zhì)向外部介質(zhì)或細胞器基質(zhì)的... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析


圖2?-?1?基因的組織表達模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??

基因,梯度,濃度,正常條件


用濃度為丨00?mmol/LNaC丨分別處理5天幼齡水稻幼苗12小時和24小時,隨后分別提??取其處理后的幼苗根部總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法進行表達分析。實驗結(jié)果(圖2-3)顯示,以正常條件下的表達量為棊準,0心15〇:川??基因在鹽脅迫條件的表達量隨著NaC'l處理時間的延長而増強,在處理24小時后表達景??達到正常條件下的3倍。該結(jié)果表明川基因在水稻中的表達量隨鹽脅迫時間的??延長而升高。??17??

雙元,條帶,大腸桿菌,菌落


通過Golden?Gate?cloning的克降策略,以邊切邊連的方式將其連接到雙元表達哉體??pYLCRISPR/Cas9上,轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使用特定的引物通過菌落PCR的方法進行陽性??驗證。結(jié)果獲得清晰單一的條帶,條帶大小約為800?bp?(圖3-2),與預(yù)期相吻合。??31??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]水稻蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的組成型及誘導(dǎo)型表達模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悅,楊雪清,王小奇.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(12)
[2]改良劑對蘇打鹽堿土玉米幼苗生長和生理特性的影響[J]. 王明華,李明,高祺,甄善繼,李喬,高紅秀,金萍.  生態(tài)學(xué)雜志. 2016(11)
[3]吉林省粳稻種質(zhì)萌發(fā)期耐堿性和耐鹽性綜合評價[J]. 馮鐘慧,劉曉龍,姜昌杰,梁正偉.  土壤與作物. 2016(02)
[4]植物耐鹽堿基因工程研究進展[J]. 郭文芳,農(nóng)萬廷,李剛強,劉德虎.  生物技術(shù)通報. 2015(07)
[5]不同供氮水平下鹽脅迫對水稻光合特性和某些生理特性的影響[J]. 劉曉龍,徐晨,徐克章,崔菁菁,張治安,凌鳳樓,安久海,武志海.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[6]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長發(fā)育及產(chǎn)量的影響[J]. 朱明霞,高顯穎,邵璽文,金峰,耿艷秋,王帥.  吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(06)
[7]鹽堿脅迫對農(nóng)牧作物種子萌發(fā)的影響研究進展[J]. 胡宗英,張紅香,孫澤威.  中國種業(yè). 2014(05)
[8]植物ATP結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運蛋白研究進展[J]. 邵若玄,沈憶珂,周文彬,方佳,鄭炳松.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報. 2013(05)
[9]植物ABC轉(zhuǎn)運蛋白研究綜述[J]. 趙胡,李裕紅.  海峽科學(xué). 2012(02)
[10]植物鹽脅迫響應(yīng)及耐鹽的分子機制[J]. 金光德,南桂仙.  農(nóng)技服務(wù). 2011(10)

碩士論文
[1]改良劑對蘇打鹽堿土及玉米生理特性的影響[D]. 王明華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]蘋果兩個WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆和表達分析[D]. 谷彥冰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長及生理生態(tài)特性影響[D]. 高顯穎.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]鹽堿脅迫下野生大豆幼苗光合特性與離子動態(tài)平衡研究[D]. 邵帥.東北師范大學(xué) 2012



本文編號:3008952

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